本研究对花鲈生长代谢相关的六个基因(GHR1、GHR2、TRαA、TRα、TRβ、 LeptinA)进行了全长克隆及相关基因盐度调控表达分析,并探究了盐度调控后花鲈血液生理生化组成的变化情况。1.花鲈生长代谢相关基因克隆生长激素受体(GHR)作为GH/IGF轴的中心环节,在内分泌调控中发挥重要作用。本实验采用cDNA末端快速扩增法(RACE)技术克隆出花鲈GHR1和GHR2的cDNA全长序列：GHR1cDNA全长序列2436bp,编码637个氨基酸；GHR2cDNA全长序列2940bp,编码582个氨基酸。GHR1与GHR2由信号肽、胞外区、跨膜区、胞内区组成,且结构存在差异。甲状腺激素受体TR介导甲状腺激素,调控机体生长、发育及代谢。用RACE技术克隆出花鲈TRaA、TRa和TRp的cDNA全长序列：花鲈TRαAcDNA全长序列1851bp,编码416个氨基酸；TRαB cDNA全长序列2370bp,编码409个氨基酸；TRβcDNA全长序列3343bp,编码395个氨基酸。瘦素leptin在摄食、生长、生殖、免疫、能量平衡等多方面有重要作用。本实验采用RACE技术克隆出花鲈LepAcDNA全长序列。结果表明：LepAcDNA全长序列为643bp,其中开放阅读框483bp,编码161个氨基酸。其氨基酸序列由信号肽和A、B、C、D四个α螺旋区域组成。花鲈LepA氨基酸序列与其他物种同源性较低,但三级结构较为保守。2.花鲈生长代谢相关基因空间表达及盐度调控表达分析脑、肾、鳃中GHR1表达明显高于GHR2；而在肌肉、垂体、肝脏、盲肠、胸腺、心脏中,GHR2表达明显高于GHR1。推测,花鲈GHR2可能为SL受体。与TRαB和TRβ相比,各组织中TRαA表达量明显较低。TRαA主要在肝脏、脑、心脏中表达。TRαB在垂体中表达量最高,其次是脑、肾脏、心脏、肝脏等。TRβ在脑中表达量最高,垂体表达量次之。TRαB和TRβ在垂体和脑中普遍表达较高。花鲈TRαB与TRβ可能共同参与TH对TSH的负反馈调控过程。花鲈LepA主要在肝脏中表达,其次为脑。急性低盐度调控实验设为海水组、半咸水组和淡水组。测定了急性低盐度调控Id、2d、4d、6d、8d舌,肝脏中GHRs、IGF1、LepA,垂体中GH,鳃和肾脏中TRs、PRLR表达水平。1d时,各组GHR1表达不变,GHR2、GH、IGF-1显著下降。之后,相对于海水组.淡水组和半咸水组GHRs口IGF-1表达升高,而GH下降,GH与GHR负相关。据结果推测,GH/IGF轴参与低渗调控可能是通过增加GHRs,进而激活下游IGF-1表达而实现。花鲈肾脏和鳃中TRs各亚型随盐度变化存在一定差异、推测TRuB可能为TR介导TH参与渗透调节的主要TRs亚型。2d时,半咸水组、淡水组间LepA mRNA无显著性差异,但都显著低于海水组,分别降至为海水组的33.38%和26.86%。结果表明,急性低盐度调控可降低花鲈LepA转录水平。在2-8d时淡水组花鲈鳃和肾脏中PRLR转录水平逐渐高于海水组和淡水组,且差异显著。结果表明,PRLR在花鲈淡水适应中发挥重要作用。3.盐度调控对花鲈血液生理指标的影响及分子机制本实验探究了盐度调控对花鲈血液生理指标影响。结果表明,淡水组红细胞和血红蛋白含量均逐渐高于海水组和半咸水组,可能由于低渗胁迫使得淡水组花鲈代谢水平升高,对氧气需求增加,进而提高自身红细胞和血红蛋白数量,保证代谢需求。海水组和淡水组花鲈血糖含量逐渐高于半咸水组。血清蛋白和脂类的研究结果较为类似,淡水组含量均逐渐高于海水组和半咸水组。实验后期,半咸水组和淡水组花鲈血清的尿素氮含量却显著升高。鱼体代谢增加,需要较高的营养物质浓度,同时产生大量代谢产物。血清总胆红素含量变化较小,而淡水组花鲈丙氨酸氨基转移酶和天门冬氨酸氨基转移酶则检测出先升高后降低的趋势,表明盐度调控可能对花鲈肝脏损伤影响较小,盐度调控使花鲈氨基酸代谢增强并提供能量。盐度调控后基因表达改变与血液生理变化可能通过代谢调节发生联系。