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越来越多的研究表明慢性炎症和癌症之间存在紧密联系。慢性炎症参与肿瘤的发生、发展和转移,其已成为肿瘤的Hallmarks之一。流行病学调查显示炎症性肠病患者包括溃疡性结肠炎和克罗恩氏病患者结肠癌的风险会大大增加,这就提示我们结肠炎在结肠癌的发生过程中扮演重要角色。而其中的机理尚不清楚。同时鉴于如此高的结肠癌风险,寻找有效、安全可靠的预防药物对具有恶变高风险的人群进行化学预防仍然是必要的。 在第一章中我们首先叙述了目前炎症性肠病的发病机制及治疗进展,然后对炎-癌转化及结肠炎-结肠癌转化的研究做了综述,并就目前临床上结肠癌药物治疗现状及进展进行了一些归纳。通过这样的综述,为此后四章的研究内容提供铺垫。 为探讨结肠炎-转化的机理,在第二章中我们就蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2(Src homologyregion-2-containing protein tyrosine phosphatase-2)在结肠炎-结肠癌转化过程中的表达变化进行了考察。SHP-2是一种由蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型11(protein-tyrosine phosphatase,nonreceptor-type11,PTPN11)基因编码的非受体型蛋白质酪氨酸磷酸酶,在很多生理过程和疾病中发挥重要作用。研究发现在小鼠结肠炎向结肠癌转变过程中磷酸酶SHP-2表达先升高后降低,结肠炎患者组织中SHP-2蛋白表达水平升高,而结肠癌患者组织中与癌旁组织相比SHP-2蛋白表达水平却显著降低。这种表达的变化提示我们SHP-2在结肠炎和结肠癌的发生过程中可能起重要作用。 为研究SHP-2对结肠炎及结肠炎-结肠癌转化的影响,我们构建了三种条件是敲除小鼠:CD4-cre(CD4+T细胞上表达)与SHP-2f/f小鼠杂交得到SHP-2CD4-/-小鼠;lyz-cre(单核,巨噬细胞上表达)与SHP-2f/f小鼠杂交得到SHP-2lyz-/-小鼠;villin-cre(肠上皮细胞表达)与SHP-2f/f小鼠杂交得到SHP-2villin-/-小鼠。拟从效应细胞(单核,巨噬细胞及T细胞)及靶细胞(结肠上皮细胞)的角度来考察各细胞中SHP-2对结肠炎-结肠癌的影响。本论文的主题是SHP-2在T细胞中的功能及其对结肠炎-结肠癌转化的影响。 CD4-cre小鼠与SHP-2f/f小鼠杂交得到了SHP-2CD4-/-条件性敲除小鼠,经过验证证实此小鼠体内的CD4+T细胞和CD8+T细胞中SHP-2都不表达。对小鼠表型分析显示SHP-2缺失对CD3+T细胞、CD4+T细胞和CD8+T细胞的比例和数量都无影响。采用anti-CD3/CD28对T细胞进行活化后发现SHP-2缺失后Th1细胞因子IFN-γ、 TNF-α和Th17细胞因子IL-17A的分泌升高,对Th2细胞因子IL-4及Treg细胞因子IL-10的分泌无显著影响。在动物模型中,SHP-2的缺失促进了小鼠体内Th1及Th17细胞的分化从而加重了DSS及TNBS诱导的结肠炎。最后发现Th1及Th17亚群的分化增加是由于SHP-2缺失后T细胞中IFN-γ-STAT1及IL-6-STAT3磷酸化信号增强所导致的。 T细胞中SHP-2的缺失导致了急性结肠炎的加重,同时我们也观察到AOM+DSS慢性模型中,敲除鼠中的炎症依然是加重的,然而此加重的结肠炎去口最终导致了模型中结肠癌发生的减少:肿瘤数目减少、大小减小、增殖减弱、凋亡增加。进一步我们发现由于SHP-2的缺失促进了CD4+T细胞IFN-γ的分泌,增强了CD8+T细胞的杀伤功能。为阐明IFN-γ在SHP-2缺失导致的肿瘤抑制中的作用,我们采用了IFN-γ抗体中和注射的方法来反证。当敲除小鼠结肠组织中IFN-γ的含量被中和抗体显著抑制后,SHP-2缺失导致的肿瘤抑制作用也基本消失。这部分的研究结果与通常认为的结肠炎促进结肠癌的发生有一定的矛盾,但这却提示我们不能忽略机体自身免疫力在抑制肿瘤过程中的重要作用。 长期服用阿司匹林已被证明可以一定程度上降低结肠癌的发生,但其副作用比较大。在论文的最后一章我们考察了穿心莲内酯对结肠癌的抑制作用,发现穿心莲内酯给药可通过诱导巨噬细胞中自噬的发生来抑制炎症小体的活化、IL-1β的释放从而减轻炎症并最终抑制结肠癌的发生,同时未观察到明显的毒副作用。作为已经在临床上使用的药物,穿心莲内酯这一新的治疗应用可为结肠炎的治疗或者结肠癌的预防提供一个选择。 综上所述,本论文发现并证实了T细胞中SHP-2的缺失导致了IFN-γ主导的炎症从而抑制肿瘤了的发生。进一步阐述了穿心莲内酯对结肠炎-结肠癌转化及结肠炎的抑制作用及机理。这些发现对于阐明结肠炎-结肠癌的机理、研制抗结肠炎及预防结肠癌药物具有一定的指导意义。