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目的:研究瞬时受体离子通道4(Transient receptor potential vanilloid4 channels, TRPV4)在胎儿脐动脉血管内皮细胞和平滑肌细胞中的表达,及其对妊娠高血压疾病患者胎儿脐动脉血管张力的影响和作用机制。 方法:(1)回顾性调查分析:将1000名孕妇筛选入围(条件见方法),分为对照组、妊娠期高血压组、轻度子痫前期、重度子痫前期组。彩色多普勒检测胎儿脐动脉收缩期峰值流速(Umbilical artery peak systolic velocity,PSV)与脐动脉舒张期峰值流速(Umbilical artery diastolic peak velocity,EDV)的比值,即S/D值。(2)TRPV4对妊高症患者胎儿脐动脉张力的影响及机制的探讨:将剖宫产孕妇,按上述方法分成同样四组,各实验组孕妇入院24h内结束分娩,MgSO4用量一致。流式细胞仪检测胎儿脐动脉血中循环内皮细胞(circulating endothelial cell,CEC);透射电镜观察脐动脉内皮细胞微观形态;免疫组织化学方法和Western blot法检测脐动脉内皮和平滑肌细胞中TRPV4和内皮源性一氧化氮(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)的分布和表达量;血管张力测定装置检测TRPV4对离体脐动脉张力的影响。 结果:(1)回顾性调查分析显示,与对照组相比,轻度子痫前期孕39周后及重度子痫前期孕35周后的S/D值升高且差异有统计学意义(P<0.05)。(2) TRPV4对妊高症患者胎儿脐动脉张力的影响及机制的探讨:①流式细胞仪检测脐动脉血循环内皮细胞数目,发现轻度和重度子痫前期组CEC数目增多,差异有显著统计学意义(P<0.01)。②透射电子显微镜观察发现与对照组相比轻度和重度子痫前期组脐动脉血管均表现出内皮细胞增生肿胀,线粒体肿胀和内质网扩张,核周间隙增大等损伤性改变。③与对照组相比,免疫组织化学与Western blot结果显示,轻度和重度子痫前期组中TRPV4表达明显上升(P<0.01),妊娠期高血压组和轻度子痫前期组脐动脉内皮细胞中eNOS的表达均明显下降(P<0.01);并且重度子痫前期的平滑肌细胞中TRPV4的表达升高(P<0.05)。④血管张力检测显示,内皮源性一氧化氮合酶抑制剂L-NAME和可溶性鸟苷酸环化酶抑制剂ODQ能有效的抑制由TRPV4激动剂RN1747引起的血管内皮依赖性舒张反应;内皮中间电导Ca2+敏感的K+通道抑制剂Apamin和小电导Ca2+敏感的K+通道抑制剂TRAM-34显著降低TRPV4激动剂RN1747对脐动脉血管的舒张作用;TRPV4激动剂RN1747能介导高钾溶液预收缩的脐动脉血管环舒张(P<0.001),但对轻度和重度子痫前期组脐动脉的舒张作用并不显著。 结论: 1、激动TRPV4通道可以通过内皮一氧化氮-可溶性鸟苷酸环化酶NO-sGC途径以及内皮源性超极化EDHF途径引起妊娠高血压疾病患者胎儿脐动脉血管舒张。 2、TRPV4在胎儿脐动脉内皮和平滑肌细胞均有表达,并随妊高症病情加重,其表达量逐渐增多,可能是妊娠高血压疾病患者胎儿脐动脉血管舒张功能减低的一种代偿。