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目的:体外实验探索人脱细胞羊膜对牙周膜干细胞生物学功能及成骨分化能力的影响方法:本实验采用组织块改良培养法分离和培养牙周膜干细胞,通过流式细胞术鉴定牙周膜干细胞,机械/酶消化法制备脱细胞羊膜基质,HE染色、免疫组化鉴定脱细胞情况和主要组分;倒置显微镜观察以及扫描电镜观察脱细胞羊膜表面结构,评价脱细胞羊膜基质作为细胞传递载体的潜力。利用脱细胞羊膜基质负载牙周膜干细胞,将其分为脱细胞羊膜基质组和TCP组(细胞培养板组)通过,Annexin V-FITC/PI细胞凋亡率检测、CCK8、细胞粘附、Transwell迁移实验检测脱细胞羊膜对牙周膜干细胞生物学功能的影响,通过设置TCP(-)(细胞培养板未诱导组)、TCP(O)(细胞培养板诱导液组)、HAAM(-)(脱细胞羊膜未诱导组)、HAAM(O)(脱细胞羊膜诱导液组),采用7、14、21天ALP染色、21天茜素红染色以及对7、14天ALP活性及21天茜素红染色半定量,利用RT-PCR、WB检测7、14、21天成骨相关蛋白COL1A1、ALP、OPN,以观察不同组别的成骨分化情况。结果:牙周膜干细胞分离和提取及脱细胞羊膜基质的制备成功。经检测脱细胞羊膜基质的主要胶原结构为I、Ⅲ型胶原,牙周膜干细胞能够正常在脱细胞羊膜上正常生长,细胞排列具有导向性,而且受到脱细胞羊膜纤维结构的影响;脱细胞羊膜负载的牙周膜干细胞与细胞培养板培养的牙周膜干细胞的细胞凋亡率、细胞凋亡周期比较,差异无统计学意义(p>0.05),并且脱细胞羊膜相比细胞培养板能够促进牙周膜干细胞的增殖、粘附和迁移;脱细胞羊膜负载的牙周膜干细胞在7、14、21天的ALP染色、茜素红染色、ALP与茜素红定量、RT-PCR、WB结果相互印证。结果显示,脱细胞羊膜能促进牙周膜干细胞的早期成骨分化,并且在中后期脱细胞羊膜诱导液组始终保持最大的成骨分化能力,而单纯的脱细胞羊膜对比细胞培养板,其成骨分化能力也得到加强。结论:推测脱细胞羊膜基质能够作为一种合适的细胞传递载体,模拟天然细胞外基质对牙周膜干细胞的增殖、粘附、迁移产生积极的影响并促进牙周膜干细胞的成骨分化能力。