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OTA是食品真菌毒素污染中常见的一种。广泛分布于饲料及饲料原料中,被摄食后会累积在畜禽体内,主要危害动物体的肾脏,其次是肺、肝脏等。并且现在已有研究称,OTA已经成为动物体肾病变的重要因素之一。而且近年来,动物OTA中毒事件也频繁发生,已经通过食物链对人类健康构成严重威胁。因此许多国家对其制定了最高允许量,并建立了监控检测体系。相对于传统的OTA检测方法,免疫胶体金是一种方便快捷的免疫检测技术,在很多方面都有广泛的应用,如临床分析、食品安全、环境检测等,该方法具有耗时少、特异性强、灵敏度高、对操作人员无太高要求等优点,因此在现代食品检测领域中发挥着重要作用。本实验中制备的OTA胶体金试纸条,可以广泛的应用于谷物类饲料的检测。恰当的标记条件是试纸条产品制备中至关重要的一步。实验中采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,探索了几个可能影响胶体金颗粒均匀性的因素。实验发现,在制备胶体金过程中,采用煮沸后相继快速加入氯金酸和柠檬酸三钠的方式制备出的金粒更均匀;金标制作中的离心条件为10000 r/min,20 min;最适pH为1 mL胶体金添加7μL,0.2 mol/L的K2CO3,最佳蛋白标记量为1 mL胶体金添加7μg单抗;T线上抗原的适宜包被浓度为0.4 mg/mL,C线上羊抗鼠IGg的适宜包被浓度为0.4 mg/mL;金标抗体的复原液为pH 8.5,0.02 mol/L Tris含1%BSA、5%蔗糖;样品垫处理液为pH 8.5,0.02 mol/L Tris中含1%BSA、1%Tween-20和0.5%蔗糖;试纸条的检测灵敏度为15 ng/mL,与OTB、AFB1、DON、ZEN和T-2毒素的交叉反应率为0%,在室温条件下至少可存放3个月。检测过程中,高效率的样品提取液,也是该方法检测中关键的一步。本实验中以一定体积比的甲醇溶液,含有一定质量分数的NaHCO3作为提取液。经实验验证,大麦粉、荞麦粉、燕麦片和全麦面包用55%(v:v)的甲醇-水,含3%的NaHCO3溶液能达到较为理想的提取效果,而谷物饲料则用70%的甲醇-水,含3%的NaHCO3提取;大麦粉和燕麦片适合提取液添加比例为1:2(m:v),荞麦粉、全麦面包和谷物饲料的提取液添加比例为1:3(m:v),提取时间为3-5 min;饲料样品为25 ng/g,其他样品中的试纸条检测线为20 ng/g;三种浓度加标测试结果显示试纸条的符合率为92%以上;提取方法的加标回收率为81.5%-104%。