人era基因的高表达、功能分析及Era抗体制备

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该研究目的是hera基因的高表达、纯化、功能分析,以及获得特异性的多抗血清.为进一步研究hEra的功能打下良好的基础.该文采用了PCR的方法自pBS-hera质粒扩增出hera全长以及C端的cDNA基因,分别将其定向克隆入pUC19中,筛选带有插段的阳性克隆,进行序列测定,证实基因正确无误.然后分别将全长和C端的hera-cDNA基因亚克隆入大肠杆菌融合表达载体pRSET和非融合表达载体pDH中,转化大肠杆菌,经诱导后做SDS-PAGE.小结:①分别以融合和非融合的基因重组技术高表达了编码hEra全长及C端的cDNA基因;②得到了hEra特异的多克隆抗血清;③证明了hEra具有GTP结合和GTP酶的活性.
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