新疆一枝蒿有效成分提取分析及活性研究

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新疆一枝蒿(Artemisia rupestris L.)是维吾尔族常用的一味药材,本研究基于前人研究工作的积累,对有效成分及其活性展开研究,包括以下几个方面:1.采用超声辅助及微波辅助提取法对新疆一枝蒿总黄酮进行提取制备,超声辅助提取法的最优提取条件为:80%乙醇、料液比1:80、提取时间60min,在此条件下的提取率达到45.66mg/g;微波辅助提取法的最优提取条件为:微波时间7min、提取温度60℃、微波功率600W,此提取条件下的提取率可达49.18mg/g;采用SPE-HPLC法测定其中槲皮素的含量,为0.323mg/g。2.采用微波辅助提取法对新疆一枝蒿多糖进行提取制备,比较Sevag法与冻融法脱蛋白效果;最佳提取条件为料液比1:40、提取时间90s、微波功率500W,在此条件下多糖提取率为32.83mg/g;Sevag法蛋白脱除效果不及冻融法。3.比较新疆一枝蒿总黄酮提取物及多糖提取物抗氧化活性、抑制亚硝化反应的能力及抑菌活性;黄酮提取物在非脂质体系中的抗氧化活性及抗亚硝化性能强于多糖提取物,脂质体系抗氧化能力黄酮提取物的效果略弱于多糖提取物;二者对实验菌种均有一定的抑制作用,但程度不一。4.利用小鼠进行体内动物实验及体外鼠源DC细胞筛选平台对新疆一枝蒿黄酮提取物、多糖提取物的免疫活性进行检测;体内实验中新疆一枝蒿提取物对小鼠免疫具有不同作用,MTT法检测表明新疆一枝蒿黄酮提取物在一定浓度范围内,对小鼠脾脏细胞增殖有着高增低抑的趋势,流式检测表明两种途径对DC细胞增长及表面marker:CD86、CD80、CD40、MHCII的表达有上调作用,高剂量比低剂量上调更为明显;体外免疫研究通过建立快速筛选平台,即分离小鼠腿骨骨髓并诱导培养DC细胞的方式,对新疆一枝蒿黄酮及多糖提取物进行考察,发现二者对DC细胞的成熟均有明显作用,且有一定的量效关系,DC marker的表达与加入提取物的浓度正向相关,新疆一枝蒿提取物具有调节小鼠机体免疫功能的作用。5.采用水蒸气蒸馏法提取新疆一枝蒿花及全草中挥发性成分,利用GC-MS分析检测鉴定其组成,在花挥发油中鉴定出36种成分,全草挥发油中鉴定出73种成份。6.采用微波消解法对野生及人工种植新疆一枝蒿进行前处理,AAS分析检测并比较部分微量金属元素的含量,结果表明,新疆一枝蒿中含有人体必需的多种金属元素,二者在含量上表现差异不大。
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