蛋白磷酸酶CaPph3及其调节亚基CaPsy2在白色念珠菌(Candida albicans)DNA损伤检验点与形态发生中功能的初步研究

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白色念珠菌是一种多形态的人类致病真菌,存在三种形态:酵母形态,假菌丝形态与真菌丝形态。白色念珠菌三种形态之间的转化对其致病性与感染能力非常关键。cAMP/PKA途径和MAPK途径是白色念珠菌控制菌丝生长的两条途径,而最近研究表明触发DNA检验点反应也能导致丝状生长。   蛋白磷酸酶4(PP4)是丝/苏氨酸蛋白磷酸酶PP2A家族的重要成员,是一种在进化中高度保守的蛋白磷酸酶。PP4c通过与不同的调节亚基形成磷酸酶复合体,在体内参与调节多项生物学功能,例如:中心体成熟,DNA损伤修复等。其中,在酿酒酵母、线虫、果蝇、哺乳动物中,PP4同源物均在DNA损伤修复中发挥重要作用。   本文中,通过基因敲除技术,我们在白色念珠菌中对PP4复合体亚基的同源物CaPph3与CaPsy2功能进行研究。结果发现Capph3△和Capsy2△不影响细胞的形态和生长,以及血清诱导真菌丝的过程,但是能抑制Spider与SLAD培养基诱导的菌丝发生。Capph3△和Capsy2△对MMS,顺铂以及紫外线(UV)等遗传毒性造成DNA损伤的条件具有很高的敏感性,并且出现假菌丝生长,细胞周期S期阻滞现象;当去除MMS与顺铂的作用,细胞从DNA损伤状态恢复的过程中,Capph3△和Capsy2△不能恢复正常细胞形态和细胞周期,而是呈现持续性的丝状生长与持续性的细胞周期阻滞,并且侵入性增加。因此,CaPph3与CaPsy2可能在白色念珠菌DNA损伤检验点反应、细胞从DNA损伤中恢复,以及形态发生中发挥重要作用。
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