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目的:观察葡萄糖神经酰胺合酶(glucosylceramide synthase ,GCS)基因在人红白血病多药耐药细胞株K562/AO2中的表达及其与肿瘤多药耐药性(multidrug resistance,MDR)的关系,并初步研究GCS基因导致白血病多药耐药的分子病理机制。方法:运用Alamar BlueTM多功能细胞染色法证实K562/AO2细胞株的多药耐药性;采用半定量RT-PCR技术检测K562/AO2及其亲本K562细胞株的GCS基因、MDR1基因、Bcl-2基因、Bax基因的表达水平及其差异。ELISA法检测耐药和野生细胞株中Bcl-2蛋白的表达情况及培养上清液中Caspase-3的表达水平。应用半定量RT-PCR技术检测K562/AO2细胞经不同剂量(均小于毒性剂量)苯基棕榈酰胺吗啡丙醇(PPMP)作用后GCS基因的表达水平,运用Alamar BlueTM多功能细胞染色法分析K562/AO2细胞经PPMP处理前后多药耐药性的变化。结果:1.证实了K562/AO2细胞的多药耐药性;2. K562/AO2细胞GCS基因和MDR1基因的表达明显强于K562细胞;3. K562/AO2细胞抑凋亡基因Bcl-2基因的表达强于K562细胞,而促凋亡基因Bax基因的表达则弱于K562细胞;4. K562/AO2细胞株的Bcl-2蛋白表达水平高于K562细胞株﹙P<0.01﹚;K562/AO2细胞株的Caspase-3表达水平低于K562细胞株﹙P<0.05﹚;5. 2.5μmol/L～25μmol/L的PPMP均可抑制K562/AO2细胞GCS基因的表达,25μmol/L时的抑制强度最大;6. K562/AO2细胞经25μmol/L PPMP处理后,多药耐药性被明显逆转。结论:GCS基因可能在白血病多药耐药中起着重要作用,PPMP通过抑制GCS活性从而对K562/AO2细胞的多药耐药性起到了调控和部分逆转作用。细胞凋亡基因的表达异常可能是GCS导致肿瘤多药耐药的主要分子病理机制之一。