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目的:研究双酚S致SK-N-SH细胞的毒性损伤作用及潜在毒性机制,为进一步研究双酚S的神经毒性提供依据和理论基础。方法:1、不同浓度双酚S(10、20、50、100、150、200、250、300μmol/L BPS)和DMSO(对照组)分别处理SK-N-SH细胞48小时后,MTT法检测细胞活性,计算双酚S处理SK-N-SH细胞48小时后的半数抑制浓度。光学显微镜下观察双酚S对SK-N-SH细胞形态学改变;流式细胞仪检测SK-N-SH细胞凋亡和细胞周期。罗丹明123染料检测线粒体膜电位变化情况。ELISA检测SK-NSH细胞BDNF的表达水平。Western Blot法检测Cleaved-caspase3、Bcl-2、Bax、TrkB、CREB、p-CREB的蛋白水平。2、在TrkB激活剂7,8-DHF预处理之后,使用双酚S(250μmol/L BPS)和DMSO(对照组)分别处理SK-N-SH细胞48小时后,光学显微镜下观察SK-N-SH细胞形态学改变;流式细胞仪检测SK-N-SH细胞凋亡。罗丹明123染料检测线粒体膜电位变化情况。ELISA检测SK-N-SH细胞BDNF的表达水平。Western Blot法检测Cleaved-caspase3、Bcl-2、Bax、TrkB、CREB、p-CREB的蛋白水平。结果:1、MTT结果显示双酚S能引起SK-N-SH细胞活性的降低,作用48小时后,双酚S能引起SK-N-SH细胞的活性呈浓度依赖性降低。双酚S引起了SK-N-SH细胞形态学改变,细胞突触变短,甚至出现细胞变圆;流式细胞术结果显示双酚S导致SK-NSH细胞发生凋亡,且发生了细胞周期阻滞,阻滞发生在G1期。罗丹明染料检测结果显示双酚S可使SK-N-SH细胞线粒体膜电位降低。ELISA结果表明双酚S降低了BDNF蛋白的表达,Western Blot结果显示双酚S降低TrkB和CREB磷酸化水平,增加Bax、cleaved-caspase3表达水平,降低了Bcl-2的表达水平。2、TrkB激活剂7,8-DHF预处理组与双酚S组比较,SK-NSH细胞的活性增加;流式细胞术结果显示SK-N-SH细胞凋亡率减少;罗丹明染料检测结果显示SK-N-SH细胞线粒体膜电位增加;ELISA结果表明SK-N-SH细胞内BDNF蛋白的表达提高,Western Blot结果显示提高了SK-N-SH细胞内TrkB和CREB磷酸化水平,降低了Bax、cleaved-caspase3表达水平,增加了Bcl-2的表达水平。TrkB激活剂7,8-DHF缓解了双酚S对SK-N-SH细胞的毒性作用。结论:1、双酚S引起SK-N-SH细胞活性下降,损害细胞形态结构,导致细胞凋亡和细胞周期阻滞,具有细胞毒性。2、BDNF/TrkB/CREB信号通路介导了双酚S致SK-N-SH细胞损伤的作用。