维生素D联合植物乳杆菌对高脂膳食小鼠脂代谢的影响

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目的:本实验通过分析维生素D与益生菌联合使用对高脂膳食小鼠脂代谢影响的相关指标,为探讨合理使用营养素防治血脂异常引起的慢性疾病提供理论依据。方法:选取SPF级雄性C57BL/6J小鼠99只,适应性饲养一周后随机选取16只小鼠为正常对照组,其余83只为高脂饲喂组,正常对照组给予维持饲料,高脂饲喂组给予含60%脂肪的高脂饲料。将高脂饲喂组小鼠随机分为5组:高脂对照组(高脂饲料+PBS+花生油)、益生菌组(高脂饲料+益生菌+花生油)、低剂量Vit D+益生菌组(高脂饲料+益生菌组+低剂量Vit D)、中剂量Vit D+益生菌组(高脂饲料+益生菌+中剂量Vit D)、高剂量Vit D+益生菌组(高脂饲料+益生菌+高剂量Vit D)。维生素D隔天经口灌胃1次,益生菌每天经口灌胃一次,样品为每日新鲜制备。灌胃持续2个月。测量小鼠末次体重,计算心脏指数、肾脏指数、肝脏指数、附睾周脂系数;测量血清TC、TG、HDL-C、LDL-C、空腹血糖、胰岛素、维生素D含量,计算血脂综合指数(non-HDL-C、AI、TG/HDL-C);采用Pearson相关性分析方法进行维生素D含量与糖脂代谢指标的相关性分析;测定粪便总胆汁酸排出量、粪便短链脂肪酸含量;HE染色观察肝脏组织和附睾周脂肪组织病理学变化;油红O染色观察肝脏组织中脂肪蓄积情况。用以上指标综合分析不同剂量联合物对高脂膳食小鼠脂代谢的影响。结果:1、高脂对照组小鼠体重显著增加(P<0.05),心脏指数、肾脏指数、肝脏指数、附睾周脂系数、血清TC、TG、LDL-C、空腹血糖、胰岛素水平均明显升高(P<0.05),HDL-C水平降低(P<0.05),同时小鼠血脂综合指数(non-HDL-C、AI、TG/HDL-C)显著上升(P<0.05)。益生菌组小鼠体重、心脏指数、肾脏指数、肝脏指数、附睾周脂系数、空腹血糖、胰岛素水平稍有下降(P>0.05),血清TC、TG、LDL-C及血脂综合指数显著降低(P<0.05),HDL-C水平显著升高(P<0.05)。低剂量Vit D+益生菌组、中剂量Vit D+益生菌组、高剂量Vit D+益生菌组与高脂对照组相比,小鼠体重、心脏指数、肾脏指数、肝脏指数、附睾周脂系数、空腹血糖、胰岛素水,血清TC、血清TG、血清LDL-C及血脂综合指数水平显著降低(P<0.05),HDL-C水平显著升高(P<0.05)。2、各组小鼠血清维生素D水平与正常对照组相比,高脂对照组、益生菌组血清维生素D水平略低(P>0.05),低、中、高剂量Vit D联合益生菌组中小鼠血清Vit D含量依次递增,差异具有统计学意义(P<0.05)。小鼠血清维生素D与血清TC、TG、LDL-C、空腹血糖、胰岛素水平呈负相关(P<0.05),与HDL-C水平呈正相关(P<0.05)。3、小鼠粪便中总胆汁酸排出量检测结果发现:各组小鼠粪便总胆汁酸排泄量组间具有显著性差异(P<0.01)。与正常对照组比较,高脂对照组小鼠粪便中的总胆汁酸排泄量明显下降(P<0.01)。益生菌组、低、中、高不同剂量Vit D+益生菌组小鼠粪便总胆汁酸排泄量较高脂对照组相比均显著升高(P<0.01),其中高剂量Vit D+益生菌组小鼠粪便总胆汁酸排泄量上升幅度最高。4、小鼠粪便短链脂肪酸含量检测结果发现:各组小鼠乙酸(Acetic acid)排出量呈现出显著性差异(P<0.01)。高脂对照组小鼠粪便中的乙酸浓度显著低于正常对照组(P<0.01)。与高脂对照组比较,益生菌组、低、中、高不同剂量Vit D+益生菌组小鼠粪便中乙酸排出量与高脂对照组比较均显著升高(P<0.01),其中高剂量Vit D+益生菌组上升幅度最大。各组小鼠丙酸(Propionic acid)排出量呈现出显著性差异(P<0.01)。与正常对照组相比,高脂对照组粪便中的丙酸含量明显降低(P<0.01)。与高脂对照组比较,益生菌组、低剂量Vit D+益生菌组、中剂量Vit D+益生菌组、高剂量Vit D+益生菌组的粪便丙酸排出量显著增加(P<0.05),其中高剂量Vit D+益生菌组粪便丙酸排出量上升幅度最大。各组小鼠对丁酸(Butyric acid)排出量呈现出显著性差异(P<0.01)。与正常对照组相比,高脂对照组粪便中的丁酸含量明显降低(P<0.01)。与高脂对照组比较,益生菌组、低剂量Vit D+益生菌组、中剂量Vit D+益生菌组、高剂量Vit D+益生菌组的粪便丁酸排出量显著增加(P<0.05),其中高剂量Vit D+益生菌组粪便丁酸排出量上升幅度最大。5、本实验小鼠肝脏HE染色与肝脏内脂滴油红O染色显示,高脂膳食组肝脏细胞脂肪样变,肝脏细胞内脂滴体积增大,相互融合。而益生菌组及维生素D+益生菌组可显著减轻高脂膳食小鼠肝脏的脂肪样变,且维生素D+益生菌组的作用优于单独使用益生菌组。小鼠附睾周脂肪组织HE染色结果显示,高脂膳食组脂肪细胞体积增大,而益生菌组及维生素D+益生菌组脂肪细胞体积较小,维生素D+益生菌组作用优于单独使用益生菌。结论:1、高脂膳食会增加实验小鼠的体重,影响机体的脏器指数;影响糖、脂代谢;影响肝脏组织、附睾周脂组织的病理学改变。2、维生素D联合植物乳杆菌可以在一定程度上减轻高脂膳食小鼠的体重;改善高脂膳食小鼠的糖代谢、脂代谢;减轻肝脏组织、附睾周脂组织的病理学改变。3、实验小鼠血清维生素D含量与空腹血糖及胰岛素水平、血清TC、TG、LDL-C水平均呈负相关;血清HDL-C水平呈正相关。4、维生素D联合植物乳杆菌可以增加高脂膳食小鼠粪便中总胆汁酸的含量。5、维生素D联合植物乳杆菌可以增加高脂膳食小鼠粪便中短链脂肪酸含量。
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