四倍体刺槐诱导及其体外植株再生的研究

来源 :中南林业科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiangyang0266
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刺槐是一种重要的速生用材树种,大力种植刺槐不仅有利于缓解我国的木材短缺的问题,而且对改善生态环境有着重要的意义。四倍体刺槐还是优良的饲料树种,具有很高的经济价值。本试验以二乔刺槐愈伤组织和刺槐种子为试验材料,利用秋水仙素结合组织培养的方法成功诱导了两种刺槐的四倍体植株,建立了两种四倍体刺槐体外植株再生体系。研究结论如下:(1)诱导二乔刺槐和刺槐的同源四倍体植株时,在诱导两种刺槐四倍体不同方法中,秋水仙素质量浓度对四倍体的诱导均产生显著作用。(2)二乔刺槐的四倍体诱导率的最高值出现在采用浸渍法与低温处理相结合的方法处理愈伤组织的组合33(秋水仙素40 mg·L-1+处理10d),为15.12%;刺槐的四倍体诱导率最高值出现在浸渍法处理刺槐种子的组合47(秋水仙素60mg·L-1+处理2 d),为2571%。可以得出,组合33和组合47为诱导四倍体二乔刺槐和四倍体刺槐的最适宜组合。二乔刺槐适合采用愈伤组织浸渍法与低温处理法相结合的方法,而刺槐适合采用种子浸渍法,这两种方法诱变率较高。(3)细胞染色体鉴定表明,两种刺槐的变异植株茎尖细胞染色体条数(2 n=4 x=44)均为原各自二倍体(2n=2 x=22)的2倍;利用流式细胞仪测定叶片单细胞DNA的含量表明,变异植株叶片单细胞DNA含量为其二倍体的2倍。(4)两种四倍体刺槐植株与对应的二倍体植株相比,叶片增大、增厚,叶色加深;叶片气孔器增大,密度减小;POD活性降低,丙二醛、蛋白质、脯氨酸含量增高。(5)以二乔刺槐和刺槐的四倍体植株叶片、茎段、带叶茎段为试验材料,对两种四倍体刺槐的体外植株再生条件进行了研究。证明带叶茎段为最佳外植体,四倍体二乔刺槐的带叶茎段愈伤组织诱导、芽诱导和根诱导的最适培养基分别为MS+0.1 mg·L-1 IBA+5 mg·L-1 6-BA、MS+0.3 mg·L-1 IBA+5 mg·L-1 6-BA和1/2MS+0.1 mg·L-1 NAA;四倍体刺槐带叶茎段愈伤组织诱导、芽诱导和根诱导的最适培养基分别为MS+0.1 mg·L-1 IBA+5 mg·L-1 6-BA、MS+0.5 mg·L-1 IBA+5 mg·L-1 6-BA和1/2MS。
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