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目的通过益气活血方对心梗(Myocardial Infarction, MI)大鼠的保护作用及其代谢表达和作用机制的研究,探讨益气活血方对MI大鼠心肌的保护作用的代谢物质基础及其作用机理,通过分析MI大鼠心脏结构、功能、血尿代谢物和相关信号通路变化及中药对其影响,为中医“心主血脉”理论提供物质基础。方法利用左冠状动脉结扎法制备SD大鼠的MI模型,在心电图评价的基础上将所有造模成功的SD大鼠随机分为模型组、益气活血方组、培哚普利组、和芪参益气滴丸组,加上只穿刺不结扎的假手术组,共5组,各组分别于术后第1天开始灌胃给药,每日1次,选择治疗后第7天和第28天两个时间点,通过观察MI大鼠的病理变化和心功能相关指标变化,评估MI模型的制作成功以及益气活血方对MI大鼠心肌病理组织的影响;通过核磁共振代谢组学研究方法筛选给药组与模型组的差异代谢物,并统计其用药组和模型组差异代谢物P值;通过免疫组化、Western blot和免疫荧光实时定量PCR法检测大鼠梗死边缘区或梗死区心肌的AKt、m-TOR及其磷酸化表达,分析与代谢组学相关的信号通路,为探讨益气活血方对MI大鼠保护作用及其调控机制提供依据。结果实验一,通过比较造模后模型组与假手术大鼠术前术后心电图的变化确定MI大鼠模型制备成功。HE染色普通光镜观察显示:假手术组心肌细胞排列整齐,未见心肌细胞肥大现象;模型组部分心肌细胞核较假手术组明显增大,心肌细胞排列紊乱,炎性细胞浸润,药物干预后心肌结构及炎性细胞浸润等均有一定的改善。超声心动方面:(1)左心室舒张末期内径与收缩末期内径结果:与假手术组相比,模型组大鼠左心室LVIDd和LVIDs质量显著性升高(P<0.01),药物干预后,大鼠左心室LVIDd和LVIDs均明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。(2)左心室容量结果:与假手术组结果比较,模型组大鼠左心室EDV和ESV显著性增大(P<0.01),药物干预后,大鼠左心室EDV和ESV均显著性降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。(3)左心室射血分数与左心室短轴率结果:28天组中,与假手术组结果比较,模型组大鼠EF%、FS%显著性降低(P<0.01)。各给药组与模型组比较,EF%、FS%均升高。实验二:血浆和尿液代谢组学差异:造模后7天和28天血浆和尿液的代谢情况在假手术组、模型组、培多普利组、芪参益气滴丸组、益气活血方组未出现明显分离趋势,其中7天组中,与假手术组相比,造模7天后血浆组找到差异代谢物22种;尿液组找到差异代谢物17种;造模28天后血浆中找到差异代谢物15种,尿液中找到差异代谢物24种。其差异代谢物主要是能量代谢、糖类代谢、脂类代谢和氨基酸代谢。中药干预后,能量代谢、糖类代谢和脂类代谢有明显的变化(P<0.05或P<0.01)。实验三:心梗边缘区或心梗区心肌组织AKt、m-TOR及其磷酸化的免疫组化、Western blot、RT-PCR检测结果:(1) Western blot结果:在7天和28天组中,与假手术组相比,各造模组p-AKt/AKt、p-mTOR/mTOR比值均较假手术组有显著差异(P<0.01)。与模型组相比,培哚普利组、益气活血方组及芪参益气滴丸组的p-AKt/AKt、 p-mTOR/mTOR比值比值均较模型组增高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);(2)免疫组化结果:在7天和28天组中,与假手术组相比,各造模组p-AKt、p-mTOR均较假手术组有显著差异(P<0.05或P<0.01)。与模型组相比,培哚普利组、益气活血方组及芪参益气滴丸组的p-AKt、p-mTOR比值比值均较模型组增高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);(3) RT-PCR结果:在7天和28天组中,和假手术组相比,各模型组AKt及m-TOR m-RNA表达均显著增高(P<0.01),和模型组相比,培哚普利组、益气活血方组及芪参益气滴丸组AKt/m-TOR m-RNA表达增强(P<0.05或P<0.01)。结论1、通过左冠状动脉结扎能成功制备MI模型,益气活血方改善MI大鼠结构和功能疗效确切,减少梗死面积,改善心功能,逆转缺血、缺氧造成的细胞形态、功能的改变,从而有效改善心肌功能障碍。2、MI大鼠其能量代谢、糖代谢、脂类代谢、氨基酸代谢及其它代谢均有不同程度的改变,益气活血方对乳酸、甘油、α葡萄糖、β-葡萄糖、糖蛋白、果糖、烟酸和胆碱等多种能量代谢、糖代谢和脂类代谢相关的产物起到调节作用,表明MI时心脏出现能量代谢、糖类等代谢障碍,而益气活血方药在改善相关代谢方面起着重要的作用。3、益气活血方可通过激活AKt/m-TOR通路,改善代谢从而发挥心肌保护作用。综合分析MI大鼠心脏结构和功能、血尿代谢物及相关信号通路的变化,为中医“心主血脉”理论提供物质基础。