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目的:以提取的SMMC-7721人肝癌细胞RNA作为抗原物质,体外转染树突状细胞(dendritic cells,DCs),观察其诱导特异性抗肿瘤效应,同时平行比较传统肿瘤冻融抗原体外冲击树突状细胞的抗肿瘤效应。
方法:取正常人外周血,以rhGM-CSF、IL-4诱导培养获取树突状细胞,应用流式细胞仪检测其纯度;Trizol法提取获得SMMC-7721人肝癌细胞总RNA,应用TransMessenger体外转染树突状细胞,对照组树突状细胞以肿瘤冻融抗原冲击;MTT法体外检测细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性。
结果:外周血单核细胞经诱导培养后,获得大量高纯度的树突状细胞,流式细胞仪检测CDlaM<+>>90%,HLA-DR、B7-1、B7-2、CD40及ICAM-1高表达;提取的SMMC7721细胞总RNA体外经TransMessenger介导转染树突状细胞,可以在体外诱导高水平的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性,并显著高于肿瘤冻融抗原冲击的DC细胞诱导组。
结论:外周血单核细胞经rhGM-CSF、IL-4刺激后可获得大量树突状细胞,经肿瘤总RNA转染后,可以诱导机体产生CTL,并能有效地诱导特异性抗肿瘤免疫活性。