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慢性粒细胞白血病(Chronic myeloid leukemia, CML)是以费城染色体(Philadephia, Ph)为特征的造血干细胞恶性集落性疾病,其恶性克隆的持续扩增与细胞增殖和凋亡速率失衡相关。当前,CML的治疗手段主要以化疗、靶向治疗和造血干细胞移植为主。虽然患者的缓解率得到提高,但5年生存率仅为15%-25%。因此,探索新的治疗策略是当务之急。癌症免疫治疗在2013年被Science评选为十大科学突破之首,被认为是治愈恶性肿瘤的希望之星。细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cell, CIK细胞)过继免疫治疗的溶瘤机制之一是自身能分泌多种细胞因子(如：γ-干扰素、IL-2、TNF-、GM-CSF)等生物活性物质对肿瘤细胞有直接抑制作用,还通过正反馈加强免疫效应细胞功能及调节免疫系统来发挥间接溶瘤作用。已有的研究表明,IFN-γ既有正向的溶瘤作用,也有促进肿瘤发展的负向调节作用。而目前,IFN-γ对白血病K562细胞株免疫逃逸分子标签的影响尚不完全清楚。白血病K562细胞株是人CML急性变细胞株,既具有急性白血病细胞的特征,又具有CML细胞独有的本质,因而是体外研究挑选抗白血病药物疗效及机制的良好细胞模型。本论文通过MIT、台盼蓝拒染、集落形成等实验观察rhiFN-γ对K562细胞增殖的抑制作用的量效和时效关系；用流式检测CD123在K562细胞的表达：用RT-PCR检狈SOCS1、p53、Cyclin D1及NSE mRNA在K562细胞的表达,以及用Western blot检测NSE蛋白在的表达；并观察200U/ml、104U/ml rhIFN-y对上述分子标签表达的影响；用β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测rhIFN-γ对K562细胞衰老的影响以及与TNF的协同作用(synergistic effect)。通过以上实验探讨rhIFN-γ对K562细胞的调节作用,为阐明CIK细胞的作用机制提供重要信息。实验结果表明,(1)103U/m-105U/ml rhIFN-γ对白血病K562细胞的增殖有抑制作用,呈时间和剂量依赖性；50～800 U/ml rhIFN-γ对白血病K562细胞的增殖抑制率在48h到72h之间降低,且200U/ml rhIFN-γ的作用最为明显。K562细胞分别与OU/ml、200U/ml、104U/ml rhIFN-γ孵育72h,流式检测到CD123在K562细胞的阳性率分别为(4.10±1.46)%、(7.20±2.50)%和(21.60±1.17)%。104U/mlrhIFN-γ组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)rhIFN-γ上调SOCS1, CyclinDl mRNA在人白血病K562细胞的表达；rhIFN-γ作用K562细胞24～48h,下调p53mRNA表达,而104U/ml rhIFN-γ作用7d,p53mRNA表达增高；104U/ml rhIFN-γ与K562细胞孵育3-7d,NSE mRNA的表达得到显著提高。上述结果与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)K562细胞与104U/mlrhIFN-γ作用2h,NSE蛋白的表达量增加,其差异有统计学意义(P<0.05)。(5)β-半乳糖苷酶染色的结果提示,2000U/ml的rhIFN-γ具有促进K562细胞衰老的作用,且与TNF-有协同作用。与对照组比较,差异有统计学意义。结论：1、rhIFN-γ对K562细胞增殖有抑制和促进的双重作用。2.rhIFN-γ上调K562细胞SOCS1,Cyclin D1,NSE mRNA表达水平；对p53mRNA表达在24～48h为下调,而104U/ml rhIFN-γ作用K562细胞7d为上调。3.104U/ml rhIFN-γ上调K562细胞CD123和NSE蛋白表达,且促进K562细胞衰老。