腹内高压兔模型相关指标的测定与肠道屏障功能相关性的研究

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目的:通过外周血中二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)、肠型脂肪酸结合蛋白(intestinal fatty acid-binding protein,I-FABP)的测定早期发现腹内高压时肠道屏障功能的改变。方法:按随机数字表法将54只健康成年新西兰兔随机分成9组,第Ⅰ组-对照(正常)组、第Ⅱ组腹腔内压力(intra abdominal pressure,IAP)15mmHg-30min、第Ⅲ组IAP15mmHg-60min、第Ⅳ组IAP15mmHg-90min、第Ⅴ组IAP15mmHg- 120min、第Ⅵ组IAP20mmHg-30min、第Ⅶ组IAP20mmHg-60min、第Ⅷ组IAP20mmHg-90min、第Ⅸ组IAP20mmHg-120min。制备模型前兔12小时禁食水。采用氮气气腹法将压力换能器、16G含侧孔的塑料导管、氮气钢瓶的三根导管分别与三通管相连,建立腹内高压兔模型(升压速度:2mmHg/5min)。保持腹腔内压力动态恒定水平。每组分别取股静脉血3ml,应用双抗体夹心酶联免疫吸附法进行DAO和I-FABP含量检测,并切取距Treitz韧带下约20cm小肠1.5cm镜下观察。结果:兔血清DAO、I-FABP含量随着腹内压力增高及持续时间的延长而逐渐升高,I-FABP含量从第Ⅰ组至第Ⅸ组依次为0.05、0.07、0.10、0.43、0.55、0.62、0.81、0.91、1.19(单位μng/ml)。DAO含量从第Ⅰ组至第Ⅸ组依次为0.11、0.15、0.32、0.60、0.94、1.22、1.48、1.87、2.25(单位μng/ml)。小肠HE染色病理切片400×光镜下观察:Ⅰ组小肠未见损伤,小肠粘膜绒毛结构完整。Ⅱ组小肠粘膜损伤相对较轻、小肠绒毛结构基本完整、上皮细胞绒毛顶端部分脱落。Ⅲ组小肠粘膜上皮绒毛脱落逐渐向基底部发展、上皮间隙增宽、细胞崩解。Ⅳ组小肠粘膜绒毛顶端逐渐脱落、萎陷。Ⅴ组小肠绒毛破损严重,部分绒毛结构消失。Ⅵ组小肠细胞水肿和粘膜下充血。Ⅶ组小肠绒毛顶端破损,同时伴固有层毛细血管裸露。Ⅷ组小肠绒毛大量损毁、固有层毛细血管大量暴露。Ⅸ组小肠固有层破坏损伤最重。并且差别存在统计学意义。结论:随着腹腔内压力的增高及持续时间的延长,腹内高压兔血液当中DAO和I-FABP的含量逐渐增加、小肠粘膜的绒毛结构病理性破坏逐渐加重。由此可以推测,检测外周血中DAO和I-FABP的含量水平能较好地反映腹内高压时引起的肠道粘膜结构和功能状态的损伤。
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