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目的: 研究河南地区肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药性以及分析临床分离产超广谱β-内酰胺酶( ESBLs)肺炎克雷伯菌中基因型的分布及药敏情况。 方法: 收集2012年1月-2013年12月临床分离的无重复的650株肺炎克雷伯菌,对分离的肺炎克雷伯菌用Vitek-2全自动微生物分析仪进行菌种鉴定;药敏采用K-B纸片扩散法, WHONET5.6软件进行数据分析,ESBLs菌株的筛选及确证采用美国临床实验室标准化委员会(CLSI)推荐的表型确认方法进行。药敏试验筛选出6株耐碳青霉烯类抗菌药物的肺炎克雷伯菌(CRKP),改良Hodge试验检测菌株产碳青霉烯酶的表型,用乙二胺四乙酸(EDTA)纸条法检测金属酶表型。采用聚合酶链( PCR)反应,用引物对260株产ESBLs肺炎克雷伯菌株的ESBLs基因(blaTEM、blaSHV和blaCTX-M)进行PCR扩增,分析产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs的基因表型情况。 结果: 共分离出肺炎克雷伯菌650株,临床分布前3位的科室分别为呼吸科(45.7%),重症监护(22.8%)和泌尿外科(7.1%),标本分布以痰液的构成比最高。650株肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶ESBLs菌株筛选试验初步筛出260株,通过进一步确认试验260株均确认为产ESBLs菌,非产ESBLs的肺炎克雷伯菌390株。650株肺炎克雷伯菌对25种抗菌药物耐药率在0.7%~100%,产ESBLs肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物耐药率普遍高于非产ESBLs。产ESBLs株对亚胺培南、美罗培南、左氧氟沙星、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦和阿莫西林/克拉维酸耐药率较低,而对头孢呋辛、头孢曲松、头孢他啶和头孢噻肟耐药率高达80%以上。除阿米卡星、环丙沙星、左氧氟沙星、亚胺培南、美罗培南、氨曲南外,产ESBLs肺炎克雷伯菌株与非产ESBLs肺炎克雷伯菌株对其他19种抗生素的耐药率不同(P<0.01)。检测出的6株CRKP对阿米卡星和替加环素敏感外,对其余23种药物均耐药;改良Hodge试验证实5株CRKP均产碳青霉烯酶,EDTA纸条法检测显示1株产金属酶。260株产ESBLs肺炎克雷伯菌株中有105株(40.4%)检测到blaSHV,120株(46.2%)检测到blaTEM,140株(53.8%)检测到blaCTX-M。 结论: 肺炎克雷伯菌耐药及多重耐药现象严重;产ESBLs肺炎克雷伯菌其耐药性高于非产ESBLs肺炎克雷伯菌;本地区产ESBLs肺炎克雷伯菌临床主要流行耐药基因型是blaCTX-M型。针对耐药性基因型的监测对临床合理使用抗菌药物具有很重要的指导意义,应加强对肺炎克雷伯菌ESBLs监测,有效控制产ESBLs肺炎克雷伯菌的散播以及耐药基因的传播。