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目的：溶酶体贮积症（LSDs）是一组由溶酶体分解代谢障碍引起的遗传性疾病，目前已知有超过50种疾病。其中一些LSDs可以进行造血干细胞移植和酶替代治疗，因此，早期诊断和及时治疗是非常关键的，特别是对于尚未出现不可逆损伤的患者来说，可以获得积极的治疗效果。本课题研究目的：1.建立LSDs酶活性检测方法及本实验室正常参考范围；2.对临床疑似患者进行酶活性检测；3.总结LSDs临床特点。方法：1.对象：病人组：2011年4月至2012年9月同济医院儿科内分泌代谢门诊收集10例疑似黏多糖患儿，男8例，女2例，年龄3～9岁。正常组：用于建立正常参考范围的血标本均来自于本院检验科，无年龄及性别差异。每种溶酶体酶均测定20-40个正常随机标本。所有血标本（包括病人和正常人）均应当天提取白细胞及血浆，立即测定酶活性或-80℃存放。2.方法：取2.5ml左右EDTA抗凝全血，离心取上清血浆，使用红细胞裂解液及PBS溶液提取白细胞，超声粉碎仪粉碎为细胞匀浆，BCA蛋白试剂盒（碧云天）测定蛋白浓度，采用人工合成荧光底物（MPSVI和MLD除外，为比色法）测定酶活性。包括以下11种酶：α-L-艾杜糖醛酸酶（MPSI），艾杜糖硫酸酯酶（MPSⅡ），α-N-乙酰氨基葡糖酶（MPSⅢ B），半乳糖-6-硫酸酯酶（MPSⅣ A），β-半乳糖苷酶（MPSⅣ B），芳基硫酸酯酶B（MPSⅥ），β-葡糖苷酸酶（MPSⅦ），α-甘露糖苷酶，芳基硫酸酯酶A（MLD），β-氨基己糖苷酶（Sandhoff病），β-葡糖苷酶（Gaucher）。结果：1.建立了使用人工合成荧光底物测定外周血白细胞或血浆溶酶体酶活性的检测方法，建立了应用比色法测定芳基硫酸酯酶A和B酶活性的方法。2.建立了本实验室11种溶酶体酶活性正常参考范围：α-L-艾杜糖醛酸酶42.62±14.04nmol/h/mg.Pro (n=24)艾杜糖硫酸酯酶415.6±124.8nmol/4h/ml血浆(n=40)α-N-乙酰氨基葡糖酶14.50±5.306nmol/h/ml血浆(n=40)半乳糖-6-硫酸酯酶223.9±68.43nmol/17h/mg.Pro (n=40)β-半乳糖苷酶148.6±29.76nmol/h/mg.Pro (n=40)芳基硫酸酯酶B150.3±45.46nmol/h/mg.Pro (n=20)β-葡糖苷酸酶25.91±11.92nmol/h/ml血浆(n=33)386.1±99.04nmol/h/mg.Pro (n=41)α-甘露糖苷酶30.03±10.52nmol/h/ml血浆(n=42)芳基硫酸酯酶A171.4±44.37nmol/17h/mg.Pro (n=20)β-氨基己糖苷酶1844±444.3nmol/h/mg.Pro (n=39)β-葡糖苷酶8.79±2.19nmol/h/mg.Pro (n=35)3.临床疑诊患儿酶活性测定：10例患儿中，MPSⅡ型4例，MPSⅣ A型1例，MPⅦ型1例，粘脂质贮积症1例。结论：1.建立了使用人工合成荧光底物测定外周血白细胞或血浆溶酶体酶活性的检测方法，建立了应用比色法测定芳基硫酸酯酶A和B酶活性的方法。2.建立了本实验室11种溶酶体酶活性正常参考范围。3.在10例临床疑似MPS患儿中，MPSⅡ型4例，MPSⅣ A型1例，MPSⅦ型1例，粘脂质贮积症1例。4. LSDs的诊断需要儿科医生在全面评估临床症状的基础上选择适当的辅助检查，如酶活性检测，外周血涂片，放射/神经生理学检查，组织活检等。对疑诊病人进行何种酶活性检测应根据病人的临床症状，其它辅助检查结果来进行选择。