【摘 要】
：
本文进行了如下研究： 一、牛γ-干扰素和人溶菌酶共表达载体的构建及表达分别将牛γ干扰素基因(BoIFN-γ)和内部核糖体位点(IRES)从pFAST-IFN载体和pIRES载体质粒上双酶切
论文部分内容阅读
本文进行了如下研究：
一、牛γ-干扰素和人溶菌酶共表达载体的构建及表达
分别将牛γ干扰素基因(BoIFN-γ)和内部核糖体位点(IRES)从pFAST-IFN载体和pIRES载体质粒上双酶切回收，亚克隆到pFASTBac-hLyz载体中，构建转移载体pFASTBAC1-IFN-IRES-hLyz；转移载体质粒转化DH10Bac感受态大肠杆菌，通过位点特异性转座作用将牛γ干扰素基因(BoIFN-γ)和人溶菌酶基因(hLyz)整合到Bacmid穿梭载体中。在含庆大霉素、四环素、卡那霉素、IPTG和X-gal的LB平板上筛选发生转座的白色菌落，提取DNA，获得重组穿梭载体Bacmid-IFN-IRS-hLyz；将重组穿梭载体Bacmid-IFN-IRS-hLyz用脂质体介导转染Sf9昆虫细胞，产生有感染力的重组杆状病毒；PCR扩增结果证实BoIFN-γ和hLyz基因重组到杆状病毒基因组中；表达产物中含有牛γ-干扰素和人溶菌酶重组蛋白。
二、牛γ-干扰素真核表达产物的纯化
分别以不同MOI的重组病毒感染Sf9细胞，并在感染后不同时间段收集上清，进行表达产物的活性检测，选择最佳的优化条件进行重组蛋白的大量生产。将重组牛γ干扰素感状病毒感染Sf9细胞，5天后收获细胞上清，透析浓缩后，用羟基磷灰石层析和疏水层析过柱，获得初步纯化的牛γ干扰素重组蛋白。
其他文献
随着我国科技的发展进步,广电传媒及影视行业在这方面也获得了巨大的推动力,到目前为止,我国的影视规模日益壮大,不仅涵盖了大荧屏的电影,长剧集的电视剧以及令人眼花缭乱、
记得一位教育专家说过：“人们在同一年龄对同一知识的学习能力是不一样的，有早晚之分，也有快慢之分，从而形成自己的学习曲线，一个人如果在短时间内提高成绩，并不是件难事，但要想改变
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病为特征的传染病。该病已经引起世界各国的高度重视,相关研究也不断展
人生的第一所学校是家庭,第一任老师是父母。一个家庭新生命的诞生就意味着家庭教育的开始,甚至从胎教就开始启蒙了。当孩子进入学校后,开始接受学校有目的和系统的全方位的
有些人之所以能实现自己的美好理想,是因为他们有自信,自信心的力量是惊人的,它既改善恶劣的现状,造成令人难以相信的圆满结果,充满自信心的人是人生的胜利者,所以,要想把某
小学品德课是一门育人课程,培养学生做人,做一个对生活“有积极态度和参与社会的能力,有爱心有责任心有良好行为和个性品质的人,是教学的中心任务。为了这个教学目标,我在课
在新的教学理念和新的教学模式的引领下,全国各地也纷纷掀起课堂教学的改革创新,在这场“以教师为主导,以学生为主体,为了每一个学生发展”理念指引下的教学改革,作为思想品
实施素质教育的提出,时间已经不是短暂的了。作为教育工作者都能更好的去工作,全面围绕实施素质教育要求广泛的学习探讨和研究,进行试验活动,能够全面具体的总结一些实施素质
由于天然牛黄产量极少一直供不应求,上世纪70年代中期,国内开始了牛体内、外培植天然牛黄的研究并取得了成功,但培植的天然牛黄其质和量一直不是非常稳定,主要原因是人们对牛黄形成的机理尚不十分了解,不能完全控制牛黄的产量与质量。为此,我们通过牛黄发生器内成黄实验、羊胆囊内成黄实验,利用电泳技术、层析技术等方法研究了胆汁中蛋白质在牛黄形成过程中的作用,动态观察了胆汁主要成分在牛黄形成过程中的变化和胆汁的成
提高初中思想品德课教学效果就是要求教师研究和改进课堂教学,使学生在学习过程中轻松愉快地掌握知识,减轻学生的课下负担,获得最大的课堂教学效益,是每一位教师要时刻追寻的