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背景:卒中后认知功能障碍(Post-stroke cognitive impairment,PSCI)是脑卒中(缺血性或出血性)后继发的认知功能减退,临床治疗效果差,严重影响脑卒中患者的预后和生活质量,对该病的早期发现和干预是治疗关键,但由于PSCI起病隐匿,早期不易被察觉和诊断,因此急需一种有效的生物学指标来辅助早期诊断。基质金属蛋白酶9(Matrix metallprotenaine 9,MMP9)生理状态下参与调控海马突触可塑性和学习记忆过程,病理状态下参与细胞外基质破坏、炎症浸润和血脑屏障破坏,在动脉粥样硬化、缺血性脑损伤及血管性痴呆中表达增高,因此,PSCI中MMP9表达水平及与认知功能减退可能存在一定关系;另外,MMP9/C1562T(rs3918242)基因多态性与动脉粥样硬化、缺血性脑梗死的发生有关,有必要进一步探讨MMP9/C1562T(rs3918242)基因多态性与PSCI发生的关系,为早期干预提供依据。目的:1.筛查PSCI在脑梗死急性期和恢复期发生情况及可能的危险因素,2.明确MMP9/C1562T(rs3918242)基因多态性与脑梗死及PSCI的发病关系,3.确定血清MMP9水平对缺血性脑卒中患者认知功能的影响以及不同部位梗死认知域受损的差异。方法:1.连续登记2013年5月至2016年9月在新乡医学院第一附属医院神经内科就诊的缺血性脑卒中患者,收集临床资料及各种脑血管疾病危险因素,所有患者均完成相关检查,所有纳入患者均同意登记临床资料、认知功能评估、抽血及定期随访。2.按照卒中后认知功能障碍筛查流程分别在发病2周和3月两个时间节点进行认知功能筛查,对缺血性脑卒中继发认知功能障碍的患者进行详细认知功能评估,并抽血备检。3.采用PCR-限制性内切酶技术及琼脂糖凝胶电泳技术对最终入组患者进行MMP9/C1562T(rs3918242)基因多态性分型,统计各基因型频率;采用酶联免疫吸附试验检测样本中MMP9浓度。结果:1.PSCI在卒中后2周发病率为7.9%(61/769),卒中后3月发病率25.59%(151/590),总发病率27.57%(212/769)2.PSCI组与认知正常脑梗死组在神经功能缺损程度比较显示,两组之间NIHSS评分无显著性差异(P>0.05);按照TOAST分型各类型构成比两组之间比较无显著性差异(P>0.05)。3.脑血管疾病危险因素多因素分析显示,高同型半胱氨酸血症分别增加了脑梗死(P<0.01)和PSCI(P<0.01)的发病风险;OSAS增加了脑梗死的发病风险(P<0.01),但是对于PSCI的发病风险无统计学意义(P>0.05);糖尿病虽增加了脑梗死以及PSCI的风险,但均不具有统计学意义(P>0.05)。4.MMP9/C1562T(rs3918242)基因位点突变对脑梗死的发生具有统计学意义(χ2=10.35,P<0.01)。其中CC基因型对脑梗死发病的风险具有统计学意义(OR=4.06,95%CI:1.49-11.11,P<0.01),提示CC基因型是脑梗死发生的危险因素。而且C等位基因频率分布差异与脑梗死的发生具有统计学意义(OR=0.59,95%CI:0.42-0.82,P<0.01)。但MMP9/C1562T(rs3918242)基因位点突变对PSCI的发生不具有统计学意义(χ2=4.43,P>0.05)5.三组受试者血清MMP9浓度比较显示,差别具有统计学意义(P<0.05)。组间比较显示PSCI组明显高于脑梗死组(P<0.05)和正常对照组(P<0.01),差别具有统计学意义;认知正常脑梗死患者血清MMP9浓度也明显高于正常对照组,差别具有统计学意义(P<0.01)。6.认知功能缺损程度危险因素分析:三组受试Mo CA分值与糖尿病、高同型半胱氨酸血症及MMP9进行偏相关性分析显示,Mo CA分值与空腹血糖值(P<0.05)、血同型半胱氨酸水平(P<0.01)显著负相关,具有统计学意义(P<0.01)。而且血清MMP9水平与空腹血糖值(P<0.05)、血同型半胱氨酸水平(P<0.01)、NIHSS评分(P<0.01)呈正相关,具有统计学意义。血清MMP9水平、NIHSS评分与Mo CA分值均不相关(P>0.05)。7.PSCI患者在视空间能力(P<0.01)、执行功能(P<0.01)及计算力(P<0.05)3个认知领域受损严重,而在学习记忆、注意力、语言功能和定向力几个认知域受损不明显(P>0.05)。8.PSCI组患者额叶(P<0.01)及基底节区(P<0.01)部位梗死所占比例明显升高,差异具有统计学意义。而在枕叶(P<0.05)及脑干(P<0.05)部位梗死所占比例明显减少,差异具有统计学意义。额叶梗死患者在视空间能力(P<0.05)、语言功能(P<0.05)、执行功能(P<0.05)下降明显,而基底节区梗死在学习记忆(P<0.05)和计算力(P<0.05)方面下降明显。结论:1.MMP9/C1562T(rs3918242)基因多态性与脑梗死的发病密切相关,C等位基因是脑梗死发病的危险因素;MMP9/C1562T(rs3918242)基因多态性与脑梗死后是否出现认知功能障碍关系不明显。2.血清MMP9水平在PSCI中明显升高,血清同型半胱氨酸水平可作为评估PSCI认知功能损害程度的间接指标。3.额叶和基底节区脑梗死更容易出现认知功能障碍,额叶梗死患者在视空间能力、语言功能、执行功能下降明显,而基底节区梗死的患者在学习记忆和计算力方面下降明显。背景:海马神经元突触后膜NMDA受体被激活后可调控突触后膜钙离子通道,介导钙离子内流,参与了学习记忆的形成和突触功能可塑性。有研究证实,MMP9可通过激活海马CA1区NMDA受体,提高CA3-CA1神经传导通路长时程增强(Long-term potentiation,LTP),改善神经突触可塑性,促进学习记忆。但是在血管性痴呆或血管性认知功能障碍小鼠模型中,发现海马CA1区MMP9表达增高,因此,MMP9/NMDA受体通路在低灌注脑损伤后认知功能障碍中的作用需要深入探讨。目的:探讨MMP9/NMDA受体通路在血管性认知功能障碍中对LTP的作用及机制。方法:1.采用双侧颈动脉结扎方法制作慢性大脑低灌注模型,采用水迷宫自动记录仪评估模型鼠学习记忆能力。2.应用场电位记录系统分析记录海马离体脑片CA3/CA1通路LTP变化。3.通过调控MMP9浓度及NMDA受体活性研究MMP9/NMDA受体通路对LTP的作用和机制。结果:1.慢性大脑低灌注小鼠海马LTP受损(P<0.01),学习记忆能力下降(P<0.01)。2.外源性MMP9提高了正常小鼠海马CA1区LTP(P<0.01),在慢性大脑低灌注脑损伤中,MMP9可加重VCI后LTP的损害(P<0.01),应用MMP9抑制剂或NMDA受体拮抗剂分别作用于VCI小鼠海马脑片,可使受损的LTP提高(P<0.01)。3.同时应用MMP9抑制剂和NMDA受体拮抗剂作用于VCI小鼠海马脑片使LTP提高程度大于二者分别应用之和(P<0.05)。结论:生理状态下MMP9激活NMDA受体,有助于增强LTP,改善突触可塑性,提高学习记忆;慢性大脑低灌注后引起的VCI小鼠中MMP9过度激活了NMDA受体,使海马CA3-CA1区LTP减弱,损害突触可塑性,导致学习记忆受损。