大鼠皮下植入模型评价生物瓣膜抗钙化性能的方法研究

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生物瓣膜的钙化会致使其性能发生退化,失去原有的生理功能,进而导致失效。评价生物瓣膜类产品的安全性,抗钙化性能便是极其重要的一环。在标准GB12279-2008《心血管植入物人工心脏瓣膜》和YY/T 1758—2020《心血管植入物肺动脉带瓣管道》中便提到了对于这类产品抗钙化性能的检测要求,但目前缺少检测方法的相关标准,制定相关的行业标准用于动物源性心血管植入物抗钙化评价十分必要。本文探究了生物瓣膜的大鼠皮下植入试验各项内容,为制定行业标准《动物源性心血管植入物抗钙化性能评价:大鼠皮下植入试验》和评价动物源性心血管植入物抗钙化性能提供试验支持。内容包括:(1)钙含量测定的方法:对常用的钙含量测定方法FAAS法与ICP-OES法进行了方法学验证,确定了两种方法均能满足人工心脏瓣膜钙含量检测需要,在满足日常检测的钙含量范围(0.000~5.000μg/m L)内线性良好,回收率高,可靠性强。(2)大鼠模型的选择:通过比较植入相同时间后植入物钙含量的高低,比较不同周龄的雌雄SD大鼠、雌雄Wistar大鼠的钙化敏感性,最终选择钙含量高且稳定的模型,即选择对钙化更为敏感的三周刚断乳Wistar雄性大鼠作为实验动物。(3)取材时间点的选择:结合钙含量的测定结果与HE染色、HE染色/Von Kossa染色叠染组织样本分析结果,比较不同植入时间样品的状态。综合考量实验效果和试验周期长短,最终确定植入56天这个关键时间点作为取材的时间点。(4)对照组正常值参考区间的确定:考虑到不同大鼠个体对于钙化反应的效果存在差异,通过对照组样品数据统计分析,确定对照组钙含量百分数95%参考区间的下限11%为可接受的阳性对照钙含量下限。以上内容通过验证试验确定了可靠性与可行性,并以此制定了推荐性行业标准《动物源性心血管植入物抗钙化评价:大鼠皮下植入试验》,以期为相关产品的抗钙化性能评判提供方法,促进生物瓣膜产品及相关动物源性心血管植入物产品的健康发展。
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