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在硬骨鱼类的疾病防治中,近年来像抗菌肽、干扰素之类的重组蛋白的使用越来越受观注。具有广谱抗病毒作用的干扰素可能是防治鱼病毒性疾病的一种新途径和新方法,相对于抗生素和疫苗的使用干扰素是一种更为理想的选择。为了研究重组干扰素对草鱼免疫保护的分子机理。本文在实验室前期克隆1个草鱼Ⅰ型干扰素基因的基础上,利用原核表达系统获得草鱼重组干扰素。草鱼重组干扰素腹腔注射免疫健康草鱼,分别于免疫后6、12、24、48、72h检测草鱼肝、脾、肾、肠、腮、心等组织中干扰素系统基因,包括IFN、IRF-1、IRF-7、STAT-3、MX、PKR的表达情况。IFN表达呈现12h明显上调,24-48h达峰值,而后下调的特点。在肾、脾、腮、肝、肠组织中IRF7表达12h明显上调,直到72h还能维持较高水平。各组织STAT-3在6h表达明显上调,表达强烈,而后直到72h能维持较高水平,在肾、脾、腮中表达更为强烈。MXI表达6h后上调,12h明显被激活表达,一直持续到48h,72h有所下降。在肠和心中相对表达较弱。PKR本底中表达较弱,6h上调并有较高水平表达,然后一直持续至72h,在肾、脾、腮中有较高水平表达。与Poly I:C的诱导效果相比,重组干扰素诱导草鱼干扰素系统基因表达上调更快、更强烈。在前面实验基础上,腹腔注射免疫12h后,荧光定量检测草鱼肝、脾、肾、肠、腮、心等组织中IFN、IRF-1、IRF-7、STAT-3、MX、PKR的表达情况。结果显示:免疫后12h,在肝、脾、肾、腮,肠、心组织中这6个基因表达显著增强。其中,肝脏组织中IFN、IRF-1、IRF-7、MX、PKR、STAT-3的表达量分别为对照组的9.32、9.00、8.00、10.3、10.3、3.1倍;脾脏组织中其表达量分别为对照组6.29、3.00、25.18、20.753、0.934、10.934倍;肾脏组织中其表达量分别为对照组6.651、9.00、10.44、8.652、10.566、5.460倍;腮中分别为4.56、7.23、13.0、13.49、1.985、19.150倍。另外,肠、心组织中有的也有明显上调,肠中其表达量分别为1.692、3.00、3.67、4.580.881、6.81倍;心组织中分别为1.68、6.00、1.47、1.180、1.948、5.890倍。重组干扰素拌料投喂健康草鱼分别于投喂后12、24、48、72h,经RT-PCR实验检测草鱼肝、脾、肾、肠、腮、心各组织中IFN的表达情况。结果显示:也能诱导各个组织中IFN基因的表达,从表达的时序上看,也呈现先上调,然后到一个峰值,而后下降的特点。比较各组织IFN表达特征,在肝、肾、脾、腮4个组织中IFN基因表达更强烈,而在肠和心中表达较弱些。在此基础上,投喂后12h荧光定量检测草鱼肝、脾、肾、肠、腮、心组织中IFN基因的表达情况。结果也显示:各个组织中IFN基因都有表达,比较各组织IFN表达特征,在肝、肾、脾、腮4个组织中IFN基因表达更强烈,而在肠和心中表达较弱些。这些结果表明重组干扰素能上调草鱼IFN、IRF-1、IRF-7、STAT-3、MX、PKR的表达,其将为重组干扰素的应用提供理论依据。