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人血清白蛋白（HSA）是人血浆中含量最丰富的蛋白，约占血浆蛋白总量的一半，HSA在血液中非常稳定，半衰期很长且易于纯化。与之对应，一些用于临床治疗的多肽和小分子蛋白由于容易被肾清除而半衰期短，从而限制了它们的治疗潜力。近年来，人们将这些小分子药物与HSA融合从而延长了它们的半衰期，并且由不同的表达系统来表达这些HSA融合蛋白，目前还不清楚究竟哪个HSA融合蛋白可以成药以及哪个表达系统适合HSA融合蛋白的生产，而HSA融合蛋白的晶体结构分析可以帮助我们做出更好的选择，所以HSA融合蛋白的结晶条件研究是必要的。本研究以毕赤酵母为表达系统进行rHSA和rHSA-IFNα2b融合蛋白的制备工艺研究及晶体学分析。本研究主要结论如下：（1）通过发酵纯化技术确立了rHSA的制备工艺：毕赤酵母工程菌Pichia PastorisGSll5/pPIC9K-rHSA经50L发酵罐发酵，发酵液冷冻离心，上清液超滤浓缩后，依次通过Blue亲和层析、Phenyl疏水层析和SP离子层析纯化，实现rHSA的规模化制备，最终rHSA的纯度可达95%以上。（2）采用Hampton和EBS试剂盒进行rHSA的结晶条件筛选，筛选出沉淀剂分别为PEG1500、PEG3350、PEG6000、MPEG2000和MPEG5000的五种结晶条件；结晶环境均为疏水性环境，且不能含有类似DTT的强还原剂。其中沉淀剂为MPEG2000条件下优化出的rHSA蛋白晶体经X光衍射分辨率最好，为3.4，通过分子置换法得到rHSA的晶体结构，与pHSA进行结构比对，二者结构大体相似，为rHSA在临床上的应用和HSA融合蛋白的晶体结构研究提供可靠的依据和基础。（3）通过发酵纯化技术确立了rHSA-IFNα2b的制备工艺：毕赤酵母工程菌PichiaPastoris GSll5/pPIC9K-rHSA-IFNα2b经50L发酵罐发酵，发酵液冷冻离心，上清液超滤浓缩后，依次通过Blue亲和层析、Octyl疏水层析、Q离子层析和SP离子层析纯化，实现rHSA-IFNα2b的规模化制备，最终rHSA的纯度可达95%以上。（4）采用Hampton试剂盒进行rHSA-IFNα2b的结晶条件筛选，共得出三个结晶条件均为疏水环境，进一步印证了HSA融合蛋白的结晶环境为疏水环境，为今后HSA融合蛋白结晶条件的筛选指明了方向。并以rHSA的结晶条件为基础进行rHSA-IFNα2b的结晶条件筛选，最终在以MPEG2000为沉淀剂时得到rHSA-IFNα2b的晶体，采用晶种法进行优化得到了形状规则的单晶，方便今后对rHSA-IFNα2b的进一步的结构研究。最后得出在筛选HSA融合蛋白的结晶条件时除了采用现成的试剂盒进行筛选，还可以以rHSA的结晶条件为基础进行筛选，为HSA融合蛋白的结晶提供更多的可能性。