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随着石化资源日益耗竭,各国开始重视可再生资源的利用。丁醇是重要的有机溶剂和化工原料,作为生物燃料,性能优于乙醇。丁醇发酵中,原料成本占总成本的比例高达60%~70%,并且由于丁醇对菌体的毒害作用,一般总溶剂产量只有18~20g/L,溶剂得率为0.34g/g。溶剂产量低、生产成本高,使发酵法无法与石油化工竞争。本文通过丁醇浸泡及N+束注入诱变筛选丁醇耐受性强、溶剂产量高的菌种,并用小麦淀粉废水与木薯等廉价原料代替玉米,降低生产成本,提高生物丁醇的竞争力。通过丁醇浸泡处理,筛得高耐受性菌株BR30-2,丁醇产量达11.77g/L,比出发菌提高16.65%。再经N+束注入诱变,筛得高产菌BH-9,丁醇与总溶剂产量分别达14.51g/L23.14g/L,较出发菌提高43.81%、38.28%,BH-9稳定性良好。研究了电子转移介体、有机酸盐、pH缓冲剂、还原剂以及震荡和通气对丁醇发酵的影响。刃天青低于0.50%o时可用作筛选高还原力菌株的指示剂。电子转移介体中,中性红显著提高丁醇比例;亚甲基蓝调控作用不明显;甲苯胺蓝抑制作用较强。有机酸盐均可提高溶剂产量,添加0.30%乙酸钠或0.10%丁酸钠时,丁醇产量分别达16.20g/L、16.59g/L。pH缓冲剂中,K2HPO4可以促进溶剂生成,浓度为0.40%时丁醇产量达16g/L;CaCO3、两种缓冲盐(Na2HPO4:KH2PO4=1:1)不利于溶剂生产。还原剂Na2S、L-半胱氨酸盐酸盐、Vc均不利于丁醇发酵。间歇震荡对溶剂产量影响不大;不同发酵时期通气对发酵影响效果不同;相同发酵时期,通气时间越长,氧气对菌体抑制作用越明显。小麦淀粉废水中添加木薯进行丁醇发酵试验,通过单因子试验和正交试验确定的优化培养基配方为:木薯粉5%,蛋白A 3%,丁酸钠0.10%, K2HPO40.10%。最适培养条件为:温度37℃,初始pH7,种龄24h,接种量3%,装液量110mL/250mL,发酵周期80h。丁醇与总溶剂产量达19.32g/L、32.34g/L,溶剂产量与溶剂得率分别比玉米丁醇提高61.70%、21.91%,生产成本大大降低。