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右旋糖酐是一种细菌性多糖,一般由细菌如明串珠菌、变形链球菌等发酵产生。由于其具有无毒、粘性高及良好的水溶性等特点,被广泛用于医药、石油、日化开采等领域,尤其是中、低和微分子量的右旋糖酐在医药行业应用较多,可作代血浆药物、补血剂等产品应用等。右旋糖酐传统生产工艺是由肠膜状明串珠菌发酵蔗糖生产大分子右旋糖酐,通过醇沉、酸解、再醇沉分级得到不同分子量右旋糖酐。本文研究了以下几个方面:1.以肠膜状明串珠菌CICC-23614为生产菌株,基于单因素实验,以细菌蛋白胨、蔗糖、KH2PO4及Na2HPO4·12H2O浓度为影响因子,蔗糖转化率为响应值,利用Box-Behnken实验对培养基的成分和浓度进行优化,使用响应面分析研究,确定最优发酵培养基的成分和浓度:蔗糖101.31 g/L,细菌蛋白胨5.66 g/L,KH2PO40.15 g/L和Na2HPO4·12H2O 1.11 g/L。在最佳发酵工艺条件下,发酵24 h,蔗糖转化率可达91.9%,相较于原始培养基发酵结果,蔗糖转化率是原始培养基的1.6倍。表明此设计工艺条件可靠。2.对右旋糖酐的酸解和酶解产物进行比较。利用GPC、FTIR及化学分析等手段对制备出来右旋糖酐样品进行结构分析。单体之间的连接方式为α-糖苷键,其中91.4%的α-(1→6)连接、6.5%的α-(1→3)连接和少量的α-(1→2)、α-(1→4)连接。酸解终产物为葡萄糖,酶解终产物为异麦芽寡糖和右旋糖酐。酶解和酸解均不改变其单元结构。酸解右旋糖酐的损失量比酶解的小,酶解比酸解右旋糖酐分子量分布系数更低。3.对右旋糖酐酶解规律进行探究,优化酶解条件。传统右旋糖酐生产工艺发酵得到的右旋糖酐分子量大,需要用酸水解的方法将右旋糖酐的糖苷键水解,从而使右旋糖酐的分子量下降。本课题在右旋糖酐溶解液中添加右旋糖酐酶,右旋糖酐酶对其水酶解,优化酶解条件,温度60℃、PH5.5,底物浓度为7%和酶浓度6U/ml时获得目标分子量右旋糖酐,为后续纯化提供数据支持。4.比较了乙醇分级沉淀和膜分离技术对右旋糖酐的分离纯化效果。着重比较了不同孔径的膜材料对含产物右旋糖酐酶解液的纯化效果,以期为形成一套较完善的分离纯化技术提供数据支持。比较了乙醇分级沉淀和膜分离技术对右旋糖酐的分离纯化效果。右旋糖酐溶液过100KDa膜,除去分子量大于100KDa的物质,滤液再通过30KDa的膜进行透析和浓缩,经喷雾干燥后得到固体样本,经检测平均分子量约为40KDa。