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目的:观察表皮生长因子(EGF)对X线导致的软骨细胞凋亡及DNA损伤的保护效应,以期能为在体实验及临床用药提供一定实验及理论依据。方法:取新生SD大鼠后肢膝关节关节软骨,采用酶消化法培养原代大鼠软骨细胞。将获得的原代软骨细胞分为四组:X线照射组,X线照射+EGF组,未照射组,未照射+EGF组。使用专用的X线机照射,以制造膝关节软骨细胞X线损伤模型,放射剂量16Gy。AO/EB染色,观察软骨细胞凋亡情况。采用γ-H2AX焦点方法及彗星实验分别检验软骨细胞DNA损伤情况,并分别用Image Pro Plus软件及CASP软件分析实验结果。结果:1.经酶消化法培养的原代软骨细胞活细胞率大于90%;2.软骨细胞凋亡观察:X线照射组与未照射组相比软骨细胞凋亡率明显增加(P<0.01),差异具有统计学意义;加入EGF后经检测发现,X线照射+EGF组与X线照射组相比软骨细胞凋亡率明显降低(P<0.05),未照射+EGF组与未照射组相比软骨细胞凋亡率亦明显降低(P<0.01),差异均具有统计学意义;与未照射组相比,照射+EGF组软骨细胞凋亡率仍明显升高(P<0.05),差异具有统计学意义。3.γ-H2AX焦点方法检测DNA损伤:X线照射组与未照射组相比平均每细胞γ-H2AX焦点数明显增加(P<0.01),差异具有统计学意义;X线照射+EGF组与X线照射组相比平均每细胞γ-H2AX焦点数减少(P<0.05),未照射+EGF组与未照射组相比平均每细胞γ-H2AX焦点数亦减少(P<0.05),差异均具有统计学意义;与未照射组相比,照射+EGF组γ-H2AX焦点仍明显增加(P<0.01),差异具有统计学意义。4.彗星实验检测DNA损伤:以CASP软件测得的尾长、彗尾长、尾矩及Olive尾矩作为彗星实验指标,X线照射组与未照射组相比上述四个指标均明显的增加(P<0.01),差异具有统计学意义;加入EGF后,X线照射+EGF组与X线照射组相比尾长(P<0.01)、彗尾长(P<0.05)、尾矩(P<0.01)及Olive尾矩(P<0.01)均减小,未照射+EGF组与未照射组相比尾长(P<0.01)、彗尾长(P<0.05)、尾矩(P<0.01)及Olive尾矩(P<0.01)亦均减小,差异均具有统计学意义;照射+EGF组与未照射组相比尾长(P<0.01)、彗尾长(P<0.05)、尾矩(P<0.01)及Olive尾矩(P<0.05)均增大,差异具有统计学意义。结论:本研究说明EGF可以降低X线照射后软骨细胞的凋亡率及DNA损伤程度,但不能完全逆转X线照射导致的软骨细胞损伤。