目的：原发性肝癌是目前常见的恶性肿瘤之一，因其发病率高、治疗困难、死亡率高，严重威胁全世界人类特别是东亚及环太平洋地区人民的生命健康。由于肝癌的发病和转移机制不能直接在人体上进行，所以建立人肝癌细胞系和人肝癌细胞系的动物模型用于体外或体内研究尤为重要。迄今为止，已建立的一系列人肝癌细胞系为肝癌的发病机理和治疗研究奠定了良好的基础。但是由于每一种肝癌细胞的来源及生物学特性不同，而且体外建立的人肝癌细胞系会发生转化，这样就给实验结果带来了不确定性。研究资料显示现有的人肝癌细胞系资源还远远不能满足研究的需要，所以本课题的实验目的是建立一株来源于原发性肝癌的新型细胞系，为肝癌的发病机制、转移机制和抗肿瘤药物的研究提供良好的细胞模型。方法：胶原酶消化法对手术切除的新鲜肝癌标本进行原代培养；细胞克隆岛扩大培养法纯化肝癌细胞；胰蛋白酶消化传代培养细胞；细胞的形态学用倒置光镜观察；胎盘蓝染色法计数细胞冻存后复苏的存活率；细胞计数法测定贴壁率和细胞生长曲线；PCR和Western-blot法检测肝细胞标志物白蛋白（AAT）、α-抗胰蛋白酶（ALB）在细胞中的表达；流式细胞仪分析细胞周期和DNA组成；免疫缺陷鼠皮下成瘤实验，计算异种移植率；常规制备染色体标本，拍照分析核型；DAPI染核法鉴定细胞系的污染情况；HCVcc（丙肝病毒上清）感染该细胞，PCR检测细胞内是否有HCV病毒；抗肿瘤药物TRAIL和索拉菲尼分别处理细胞，流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果：成功建立一株新的人肝癌细胞系，命名为HLCZ02细胞。HLCZ02细胞体外培养达半年以上，生长快速稳定，细胞系无污染，AAT和ALB为强阳性。细胞周期检测显示，DNA合成旺盛，细胞为亚四倍体。该细胞经皮下接种可致免疫缺陷鼠致瘤。HLCZ02细胞能被HCV病毒感染，对TRAIL和索拉菲尼均敏感。结论：成功建立一株新的来源于原发性肝癌患者的人肝癌细胞系HLCZ02，期望为原发性肝癌发病机制的研究和抗肿瘤药物的筛选提供良好的细胞材料。