Ⅰ、大鼠心肌细胞的LIF表达及永生化尝试;Ⅱ、C57BL/6J小鼠基因组文库的建立

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为了简化大鼠心肌条件培养基的制作过程,研究人员尝试了用磷酸钙-DNA共沉淀法永生化大鼠心肌细胞,希望未有得到永生化的大鼠心肌细胞系.但是,从4个永生化克隆中,研究人员未能得到仍保持维持ES细胞未分化状态特性的永生化细胞系.在与永生化前的大鼠心肌条件培养基及其他培养方法比较时,研究人员的结果再次证实了LIF的含量与维持ES细胞未分化状态的能力具有密切的相关性.从RT-PCR检测永生化前后的大鼠心肌细胞来看,永生化明显表达LIF的细胞在永生化后表达量检测不到了,而LIF缺乏的永生化细胞系,在维持ES细胞未分化状态的能力上明显欠缺.在第二部分工作中,研究人员选择了C57BL/6J小鼠建立了新的基因组文库.在建库过程中,研究人员摸索出使用小鼠的大腿肌肉组织作为材料,可以更容易地提取高纯度的大片断基因组DNA,并按照经典的建库方法,用Lamda噬菌体做载体建成了C57BL/6J小鼠基因组文库.
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