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2005年,国际上多个研究小组几乎同时报道,在骨髓增殖性肿瘤(myeloproliferative neoplasm, MPN)患者造血干/祖细胞水平存在的获得性,克隆性的Janus激酶2 (the j anus kinase 2, JAK2) V617F体细胞突变。随后,国内外学者对其进行了广泛的研究。据报道,JAK2 V617F存在于65%-97%的真性红细胞增多症(polycythemia vera, PV)及23%-60%的原发性血小板增多症(essential thrombocythemia, ET)和35%-64%的原发性骨髓纤维化(primary myelofibrosis, PMF)以及20%慢性中性粒细胞白血病(chronic neutrophil leukemia, CNL)患者中。随着JAK2 V617F突变在MPN发病中的逐渐认识,2008年世界卫生组织(the World Health Organization,WHO)对MPN提出了新的分类及诊断标准。在新的分类及诊断标准中,强调了JAK2 V617F突变等其他分子及细胞遗传学事件在MPN中的作用。然而,JAK2 V617F突变并不是MPN所特有,如在5%骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome, MDS)患者也存在。另外,单一的JAK2 V617F突变在临床上会引起不同的疾病亚型。JAK2 V617F阴性的MPN是如何发病的,是否存在其他的癌基因或抑癌基因事件促进MPN的发生或影响其表型,也不是很清楚,尚有待进一步研究。2008年,Delhommeau等率先报道,在MPN患者中存在一种新的潜在抑癌基因ten-eleven translocation 2 (TET2)的突变。随后的研究发现,TET2基因突变广泛存在于各型JAK2 V617F阳性或阴性的MPN、MDS、原发或继发的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)中。TET2突变包括框移突变,无义突变和错义突变,发生在TET2基因的多个外显子及多个位点上,但以3号,11号外显子最多见。尽管对JAK2V617F突变有些研究报道,但关于MPN中TET2基因突变及其临床特征,目前国内尚未见相关报道。为此,本研究分析了MPN患者中JAK2 V617F和TET2基因的突变情况及其临床特征,TET2基因突变与JAK2 V617F突变对MPN患者表型的影响。首先,抽取40例MPN患者的骨髓或外周血,并提取其细胞基因组DNA,采用等位基因特异性荧光实时定量PCR (polymerase chain reaction, PCR)方法分析JAK2 V617F突变。同时,对所有患者TET2基因进行PCR扩增。在此基础上,将通过琼脂糖凝胶电泳验证的PCR扩增产物进行DNA序列测定,测序结果与美国国家生物技术信息学中心(National Center for Biotechnology Information, NCBI)提供的DNA数据库进行同源性比较,分析TET2基因突变情况。最后,分析TET2基因突变的临床特征以及TET2基因突变与JAK2 V617F突变对患者表型的影响。结果显示,40例MPN患者中,28例为JAK2 V617F突变阳性,占所检测患者的70%。其中,PV患者16例(占所检测PV患者的76.2%),ET患者7例(占所检测ET患者的53.8%),以及5例无法明确分型的MPN患者。JAK2 V617F突变型PV患者发病年龄高于野生型患者(P=0.020),JAK2 V617F突变型ET患者外周血白细胞计数高于野生型患者(P=0.026),但血小板数低于野生型患者(P=0.048)。40例MPN患者中,有4例存在TET2基因突变,占所检测患者的10%。其中,2例为PV患者,另2例为ET患者。在这4例患者中,TET2基因突变均发生TET2基因的第11号外显子,分别是位于TET2基因第5548位核苷酸的T突变为G,导致第1721位亮氨酸突变为色氨酸；位于TET2基因第5670位核苷酸的A突变为G,此突变使TET2的第1762位异亮氨酸突变为缬氨酸；位于TET2基因第6269位核苷酸的G突变为A,该突变为同义突变；位于TET2基因第6364位核苷酸的G突变为A,导致TET2第1993位精氨酸突变为为谷氨酰胺。4例TET2基因突变患者均存在JAK2 V617F突变。TET2突变型患者在发病年龄、性别、外周血白细胞数、红细胞数、血小板数以及血红蛋白浓度与野生型患者无显著性差异。以上结果表明,JAK2 V617F突变存在于大部分MPN患者,且JAK2 V617F阳性与JAK2 V617F阴性患者临床特征存在一定差异。TET2基因突变仅存在于小部分MPN患者,主要发生于TET2基因的第11号外显子,可与JAK2 V617F突变同时存在。TET2基因突变与患者发病年龄、性别可能无关,也不影响患者的外周血血象。