巯基乙酸对小鼠卵母细胞成熟的影响及其分子机制研究

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lizhou555
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巯基乙酸(TGA)是持久性卷发剂的主要功效成分,大量研究表明其具有生殖毒性。本文分别在体内和体外研究了巯基乙酸对小鼠卵母细胞成熟各相关指标的影响,并初步探讨了MAPK途径在其中的作用。 研究结果表明,体外实验中0mM、0.2mM、1.0mM和2.5mM TGA剂量组卵母细胞生发泡破裂(GVBD)率均在90%左右,各组之间差异不显著;各组第一极体(PB1)排出率分别为78%、67%、65%和51%,随着TGA剂量的增加PB1排出率逐渐减少。免疫荧光染色结果发现,随着TGA处理剂量的增加,卵母细胞纺锤体和染色体结构异常细胞的比例和异常程度增加;各TGA剂量组均可观察到皮质颗粒(CGs)在卵母细胞膜下的线状排列,但随着TGA剂量的增加,质膜下CGs的密度降低,胞浆中CGs的密度有增加的趋势。0 mM TGA组卵母细胞中有非常明显的无皮质颗粒区(CGFD)形成,0.2 mM组也形成了CGFD,但1.0mM和2.5mM两个剂量组未观察到CGFD。Western blot结果显示,1.0mM TGA剂量组中p-MAPK表达量显著降低,p-cdc2表达增加。体内实验表明,巯基乙酸经皮染毒后,37.8125 mg/kg、75.625 mg/kg和151.25mg/kg组小鼠排卵量分别为32±4,28±5和13±5,其中37.8125 mg/kg、75.625mg/kg两组与对照组(38±6)相比差异不显著,而151.25 mg/kg组排卵数明显低于对照组和37.8125 mg/kg组。形态学结果显示TGA处理的小鼠,其卵母细胞内纺锤体形态明显大于正常组,但CGs的分布未见明显差异。各组小鼠卵母细胞的孤雌激活率分别为96%、90%、86%和67%,151.25 mg/kg剂量组孤雌激活率显著低于对照组。本研究提示TGA可抑制卵母细胞体外成熟,诱导卵母细胞纺锤体、染色体等结构异常,巯基乙酸可能通过对MAPK活性的抑制产生该作用;在体内,巯基乙酸能抑制小鼠排卵和卵母细胞孤雌激活,对后续胚胎发育可能会产生潜在影响。
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