细胞替代治疗作为终末期肝病的治疗方法,给无数患者带来了新的希望。胚胎干细胞和成体肝前体细胞因其多能性成为理想的治疗用细胞来源。猕猴作为一种重要的实验动物,因为与人的高度相似性,成为临床前研究的理想的替代模型。本文就猕猴胚胎干细胞向肝细胞分化中的调控因子和猕猴成体肝前体干细胞的多能性进行了研究。　　 首先我们以猕猴胚胎干细胞向肝细胞分化为模型,采用分步诱导法研究细胞基质和生长因子对分化的影响。经activin A诱导后,约80％胚胎干细胞分化为限定性内胚层细胞。得到的限定性内胚层细胞在一型胶原或者鼠尾胶原上继续分化。在一型胶原上的分化细胞呈现未成熟肝细胞特征,而在鼠尾胶原上产生高达68%±7%AFP/CK18双阳性细胞,且分化的细胞具有典型的肝细胞样结构,表达成熟肝细胞相关的基因和功能。而在不添加生长因子的鼠尾胶原体系中,只检测到未成熟肝细胞基因的表达。本文建立猕猴胚胎干细胞高效定向分化为肝细胞的体系,并揭示鼠尾胶原和生长因子共同作用促进肝细胞的发生。　　 另外我们报道了猕猴肝脏上皮前体细胞可以分化为肌成纤维细胞。TGF-β诱导以后,部分成体肝脏上皮前体细胞克隆转化为成纤维样细胞。所得成纤维样表达间充质细胞标记但失去了上皮细胞标记的表达。成纤维样细胞可以培养长达40代,并表达肌成纤维细胞标记。此外,延时视频观察细也观察到成纤维样细胞的运动增加。我们的结果表明,猕猴肝脏上皮前体细胞,通过上皮—成纤维转化转化为肌成纤维细胞。这项发现将有助于理解肝纤维化中肌成纤维细胞的起源。　　 PI3K信号通路对胚胎的生存和发育都有着重要的作用。PTEN是该通路中的负调节因子,但是PTEN在早期胚胎发育中的存在和分布以及作用都还未见报道。通过免疫荧光,我们发现PTEN从一细胞到囊胚都有表达,而活化的PTEN主要分布在致密桑椹胚的卵裂球表面,这一结果暗示PTEN可能在致密化中有某种作用。而在培养中添加PTEN抑制剂bpV,可以显著降低胚胎发育率甚至引起二细胞阻滞。我们的结果证明PTEN在小鼠着床前胚胎发育中有重要作用。