番茄环纹斑点病毒的NSs基因功能研究

来源 :云南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:du_one
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
Tospovirus病毒在全球范围内广泛分布且危害严重。Tospovirus病毒成员番茄斑萎病毒(Tomato sponed wilt virus,TSWV)及风仙花坏死斑病毒(Impatiens necroticspot virus,INSV)编码的NSs已证实是病毒的沉默抑制子,通过结合dsRNA和siRNA而抑制宿主的RNA沉默作用。番茄环纹斑点病毒(Tomatozonate spot virus,TZSV)是在云南发现的Tospovirus新种,在番茄和辣椒上引起叶部环斑、顶芽坏死及果实黄化或坏死环斑。为探明TZSV的NSs基因功能,本研究克隆了TZSV、TSWV、INSV的NSs基因并构建到植物表达载体pGD上,分别与pGD-smGFP共侵润转GFP基因的16c本生烟,长波紫外灯(主波长365nm)照射下显示TZSV的NSs基因与TSWV、INSV的NSs基因功能相似,能够抑制16c本生烟的局部沉默及系统沉默。用Western blotting及Northern blotting检测侵润区GFP蛋白及GFPmRNA的表达量,结果显示在侵润3-6天后,与阴性对照相比,TZSV、TSWV、INSV的GFP蛋白及GFP mRNA的表达量增加,证明TZSV编码的NSs为病毒的沉默抑制子。基于生物信息学对Tospovirus病毒NSs保守位点及NSs结构的分析,构建了14个TZSV NSs基因缺失突变体,农杆菌共侵润野生型本生烟,发现NSs N端氨基酸的缺失对蛋白活性影响要比C端缺失影响大,推测TZSV NSs蛋白质序列的61-330区域是抑制RNA沉默的关键区域。   利用原核表达技术获得TZSV的NSs蛋白,并免疫家兔获得了NSs的多抗血清,为下一步研究该蛋白在细胞内定位与其功能的关系,作用方式等研究提供便利条件。  
其他文献
双目立体视觉图像处理技术是现今图像界的研究热门。本文主要研究微创手术机器人双目立体视觉的图像信息匹配融合技术,其内容包含原始医学图像的特征信息的检测与提取以及基于
交流接触器作为一种大规模使用在工农业中的低压电器,其在全国的使用量数以亿计,耗电总量巨大。因此,为缓解能源紧张,构建节能型社会,设计一款具有自主知识产权的交流接触器节能芯片有重要意义。本文根据交流接触器“强电吸合,弱电吸持”的工作原理,设计出一款交流接触器节能芯片ZDLX-1H(浙大绿芯1号)。以此芯片为核心的节能器与型号为CJ20-100A(220V)的交流接触器配合使用,使交流接触器能够在很小
目的:对消痛灵喷雾剂的制备工艺优化,观察最优工艺制备的喷雾剂对小鼠的抗炎镇痛作用.方法:采用L9(43)正交实验,以水杨酸含量为考察指标,优选出最佳制备工艺;将小鼠随机分为
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
期刊
学位
本研究以滇池流域次生性滇青冈群落以及人工林群落为对象,研究原生性和次生性滇青冈群落的结构和动态,并与流域内广泛分布的华山松林、银荆林、桉树林比较,探讨其在物种多样
B染色体是不与物种常染色体发生重组、非孟德尔遗传的、异染色质化的非必需的一类染色体。至今,在近2000多种生物中发现了B染色体的存在,其中包括动物、植物以及真菌等有机体。
原发性高血压(Essential Hypertension,EH)是一种严重威胁人类健康的常见的疾病,是目前造成心血管疾病死亡的主要原因之一。肾素.血管紧张素.醛固酮系统(RAAS系统)在体内水盐
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
期刊
跟踪与数据中继卫星系统(TDRSS)是转发地球站对低、中轨道航天器的跟踪测控信号和中继从航天器发回地面的信息的通信卫星系统。TDRSS代表了国际上测控领域的新的发展方向,是衡