组织工程骨用于兔腰椎融合过程中相关基因表达

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目的:观察组织工程骨即重组人骨形态发生蛋白-2(recombinant human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2)/异体骨复合骨不同时间点融合骨组织中相关生长因子基因水平的变化。方法:新西兰大白兔60只,随机分为3组。在L5,L6横突间行后路植骨融合术,分别植入复合骨条,自体骨条及异体骨条,于术后第1、2、3、4、5周取融合标本,用原位杂交及实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(Real time RT-PCR)分析内源性BMP-2、BMP-7和血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果:原位杂交染色后BMP-7除在1周复合骨最高外(P>0.01),从第2周起自体骨组高于复合骨组,均优于异体骨组,第4周均达峰值复合骨组(61.12±2.42)和自体骨组(64.64±2.00)及异体骨组(50.20±2.15);而VEGF第3周均达到峰值,复合骨组(65.43±2.67)和自体骨组(63.23±4.63)及异体骨组(45.69±2.61),第3、4、5周复合骨组和自体骨组差异无统计学意义(P>0.05),均高于异体骨组。RT-PCR示:术后第3周,复合骨组BMP-2为(5.3519±1.0384),VEGF为(0.9257±0.2534),均达到峰值且高于异体骨组和自体骨组(P<0.05),之后则缓慢下降。第4周后,内源性BMP-2表达仍保持较高的水平,但VEGF的水平与自体骨组和异体骨组差异无统计学意义(P>0.05)。BMP-7变化趋势和原位杂交变化一致,第4周复合骨组(1.2115±0.4007)和自体骨组(1.7859±0.1033)及异体骨组(1.1322±0.1233),5周三组间均降低,但无统计学差异(P>0.05)。结论:rhBMP-2/异体骨复合骨能缓慢,持续,稳定的释放rhBMP-2,有效地诱导了内源性生长因子的表达,极大地促进了成骨效应和血管化。
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