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目的:建立兔脊髓缺血-再灌注损伤模型,研究经腹主动脉灌注利多卡因对脊髓缺血-再灌注损伤的是否有保护作用、保护效应与剂量是否相关以及最佳保护剂量范围。
方法:健康新西兰大耳白兔32只,采用随机区组的方法将动物分为4个组,每组8只。分别为NS组(生理盐水,空白对照)、L10组(利多卡因,10mg/kg)、L20组(利多卡因,20mg/kg)和L40组(利多卡因,40mg/kg)。静脉麻醉后气管插管,持续监测平均动脉压、心率、脉搏血氧饱和度及直肠温。手术暴露腹主动脉和双侧髂总动脉,经股动脉置一细导管至腹主动脉内距左肾动脉1.0 cm处,于左肾动脉开口远端0.5 cm阻断腹主动脉,同时阻断左、右髂总动脉,阻断即刻开始经导管向阻断的腹主动脉远端灌注实验药物,每组的灌注容积均为5ml/kg,连续灌注30min 后开放血管。于动物完全清醒即刻、再灌注后6h、24h和48h对双后肢神经功能进行评估;再灌注48h,取脊髓L3~5三个节段制作石蜡切片,HE染色,光镜观察并计数正常前角运动神经元。用SAS 8.0软件进行统计学分析,各组不同时点的生理指标以均数±标准差(x±s)表示,应用广义线形模型及方差分析进行统计学分析;神经行为学评分以绝对数表示、脊髓前角正常神经元计数以中位数(四分位数间距) [M(Q)]表示,采用非参数的Kruskal-Wallis检验进行多个样本总体差异的比较。
结果:清醒即刻、再灌注后6h、24h和48h,利多卡因各组(L10组,L20组,L40组)的双后肢神经行为学评分等级明显高于NS组。各组组间比较表明: L40组在各时点评分高于L10组和L20组,L20组在各时点评分高于L10组。再灌注48h,各组正常神经元计数比较有统计学差异,各组两两比较均有明显差别。脊髓前角正常神经元中位数由多至少的排列顺序为L40组>L20组>L10组>NS组。
结论:利多卡因处理组的动物神经行为学评分和脊髓前角正常神经元计数均优于生理盐水对照组,提示利多卡因能减轻脊髓缺血-再灌注损伤,改善神经功能转归。利多卡因对脊髓缺血-再灌注损伤的保护作用在所研究的剂量范围内呈剂量依赖性,随剂量增加保护作用增强。