【摘 要】
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目的研究HBx基因对肝卵圆细胞转分化的影响,为HBx基因诱导卵圆细胞转分化成肝癌细胞的机制提供初步理论依据。方法以稳定表达HBx的转基因卵圆细胞株pEGFP-HBx卵圆细胞为实验
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目的研究HBx基因对肝卵圆细胞转分化的影响,为HBx基因诱导卵圆细胞转分化成肝癌细胞的机制提供初步理论依据。方法以稳定表达HBx的转基因卵圆细胞株pEGFP-HBx卵圆细胞为实验组,pEGFP卵圆细胞及LE/6卵圆细胞为对照组,运用透射电镜、流式细胞术、PAS染色、集落形成试验、Realtime-PCR、免疫细胞化学检测pEGFP-HBx卵圆细胞在细胞形态、细胞周期、分化标志物、癌基因c-myc及TGF-ɑ表达变化。结果(1)pEGFP-HBx卵圆细胞体积增大,核具有明显异形性;(2)流式细胞仪检测显示与对照组相比,pEGFP-HBx卵圆细胞G0/G1期细胞百分比下降, S期和G2/M期细胞百分比明显升高,而且非整倍体细胞明显增多;(3)PAS染色显示pEGFP-HBx卵圆细胞胞浆内可见大量糖原颗粒;(4)软琼脂中可见pEGFP-HBx卵圆细胞克隆集落形成;(5)癌基因c-myc及TGF-ɑ表达量明显增高,卵圆细胞分化指标HNF-4ɑ、AFP表达上升,CK-7、CK-19下降。结论HBx基因可以引起卵圆细胞异常分化,并直接诱导卵圆细胞发生恶性转化。
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