TiCu/TiCuN纳米复合膜涂层的抗菌性与生物相容性研究

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目的:本研究采用轴向磁场增强电弧离子镀(AMFE-ARP)方法,在316L不锈钢表面沉积了三种不同设计的TiCu/TiCuN纳米复合(M1、M2和M3),使其能够有效抑制细菌的生长和增殖。本研究的目的是探讨这三种不同设计的TiCu/TiCuN纳米复合膜的抗菌活性和细胞毒性。材料与方法:本实验选择金黄色葡萄球菌以及大肠杆菌,作为体外定量抗菌实验的菌种,以TiN为对照对TiCu/TiCu N纳米复合(M1、M2和M3)的抗菌性能进行检测;将细菌与材料共培养24h后,用平板计数法评价其抗菌性能;同时利用荧光染色试剂盒,对共培养在样品表面的细菌进行染色,分析TiCu/TiCuN纳米复合(M1、M2和M3)对细菌生物膜的作用。将三种TiCu/TiCuN纳米复合(M1、M2和M3)及对照组TiN浸润在0.9%NaCl溶液中1、3、7、30天分别测定不同膜表面铜离子的释放量。同样以TiN为对照,研究TiCu/TiCuN纳米复合膜(M1、M2和M3)与小鼠胚胎成骨前体细胞(MC3T3E1)的体外生物相容性;将细胞与材料共培养1、3、7天后,利用CCK8检测试剂盒,评价复合膜对于细胞增殖的影响;采用细胞骨架荧光染色标记法观察细胞在合金表面的粘附及生长情况。结果:平板法抗菌实验结果显示,TiCu/TiCuN纳米复合膜(M1、M2和M3)对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌率均达99%以上,结果表明,TiCu/TiCuN纳米复合膜(M1、M2和M3)对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均有较好的抗菌活性。细菌免疫荧光染色实验的三维照片观察结果显示,与TiN相比,TiCu/TiCuN纳米复合膜(M1、M2和M3)表面的死亡金黄色葡萄球菌明显增加。在离子溶出实验中,在一天时间点,三种TiCu/TiCuN纳米复合膜(M1、M2和M3)样品测出释放Cu2+离子的浓度大约是0.036-0.064μg/ml。在第1、3、7、30天观察到M1纳米复合膜释放的Cu2+离子浓度明显低于其他含铜膜。CCK-8法细胞增殖实验,结果表明,在1、3、7天的试验周期内,含铜复合膜与对照组的细胞活力无显著差异,说明TiCu/TiCuN纳米复合膜(M1、M2和M3)与S-TiN薄膜相比,同样具有良好的细胞相容性。细胞形态观察表明,TiCu/TiCuN纳米复合膜(M1、M2和M3)表面的细胞贴附生长良好。结论:TiCu/TiCuN纳米复合膜表现出较好的细胞相容性和抗菌活性。TiCu/TiCuN纳米复合膜作为抗菌涂层在口腔种植领域有很大的应用潜力。
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