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内生细菌是其部分或全部生活史存活于健康植物组织内部且宿主植物没有明显感染症状的细菌。已报道的内生细菌研究中,大多集中于维管植物,对结构简单、无维管组织的苔藓植物研究甚少。在黄土丘陵区,苔藓植物是防止水土流失的重要植物类群,而且其构成的微生境是微生物种类最丰富的环境之一本实验选用黄土丘陵区苔藓植物优势种——短叶对齿藓(Didymodon tectorum)为材料,利用传统培养法和高通量测序探析其内生细菌物种多样性,并观察代表菌种的发酵产物对宿主孢子萌发及原丝体生长的影响。主要结果如下:1.利用传统方法分离内生细菌前,先筛选出短叶对齿藓表面灭菌的最佳条件为70%乙醇3min+2% NaCIO lmin。表面灭菌后的植物体分离得到68株可培养内生细菌,利用16S rDNA序列分析及菌落形态、生理生化性质鉴定将它们分属于芽孢杆菌属(Bacillus)下的7个种,分别为:枯草芽孢杆菌(B. subtilis),简单芽孢杆菌(B. simplex),蜡状芽孢杆菌(B. cereus),烟酸芽孢杆菌(B. niacini), B. aryabhattai,短小芽孢杆菌(B. pumilus), Bacillus sp.,其中枯草芽孢杆菌为优势种。2.枯草芽孢杆菌菌株DT-1的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇相提取物在1 μg/ml= 10 μg/ml、100 μg/ml三种浓度下对宿主孢子萌发均无显著影响;石油醚相提取物在三种浓度下不同程度的抑制宿主原丝体生长,乙酸乙酯相提取物在1μg/ml极显著促进原丝体生长,正丁醇相提取物在1μg/ml、10μg/ml浓度下也起到显著促进作用。3.蜡样芽孢杆菌菌株DT-9的三种提取物三种浓度对宿主孢子萌发均无显著影响;石油醚相提取物在不同浓度上对宿主原丝体生长均起到显著抑制作用,乙酸乙酯和正丁醇相提取物在不同浓度下均显著促进宿主原丝体的生长。4.利用高通量测序法探究短叶对齿藓的内生细菌群落组成,结果表明:其内生细菌类群主要由7门,11纲,16目,32科组成。其中,变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteri a)为优势门;优势纲为α-变形菌纲(Alphaproteobacteria)、放线菌纲(Actinobacteria)和β-变形菌纲(Betaproteobacteria);优势目主要由放线菌目(Actinomycetales)、根瘤菌目(Rhizobiales)和鞘脂单胞菌目(Sphingomonadales)组成;鞘脂单胞菌科(Sphingomonadaceae)中的鞘氨醇单胞菌属(Sphingomona s)为优势属。