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爵床科植物穿心莲是中医临床上常用中药材之一,其味苦,性微寒,归肺、大肠经。具有清热解毒、凉血消肿之功效,有天然抗生素的美称。通过研究发现穿心莲中的主要有效成分是以穿心莲内酯为代表的二萜内酯类化合物,其具有抗炎保肝、抗肿瘤、外用消肿止痛等作用。临床上广泛用于肺炎、流感、细菌性痢疾等感染性疾病,本课题以穿心莲中分离得到的有效成分及穿心莲内酯类化合物具有一定的抗炎活性为前提,通过穿心莲提取物、有效部位、穿心莲内酯及其衍生物抗大鼠哮喘实验,来研究穿心莲有效成分及穿心莲内酯类化合物的抗哮喘作用。以卵清蛋白为致敏原,配合中性Al(OH)3制成抗原凝胶诱导大鼠,雾化吸入1%卵清蛋白溶液,制备大鼠哮喘模型。采用灌胃的方式给予大鼠穿心莲提取物、有效部位、穿心莲内酯及其衍生物。对大鼠肺部白细胞总数,嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞的百分含量及肺部灌洗液中炎症因子(白介素-1、肿瘤坏死因子-α)和免疫因子(白介素-2、干扰素-γ)水平进行评价。考察了穿心莲提取物、有效部位、穿心莲内酯及其衍生物的抗哮喘作用。观察发现,模型组大鼠在雾化吸入过敏原时出现烦躁、抓挠、腹肌抽搐等症状,部分大鼠出现呼吸哮鸣音,和正常组相比较大鼠毛发光泽度降低,进食和饮水有所减少。通过给予大鼠穿心莲有效成分及穿心莲内酯类化合物,烦躁、抓挠现象基本消失,部分大鼠出现的呼吸哮鸣音明显缓解。解剖大鼠观察肺组织,模型组大鼠肺部充血明显,有大面积淤血并伴有红色斑点,肺组织整体水肿,表面粘液增多,气管内部有白色痰液样分泌物。正常大鼠肺部无大面积充血和红色斑点,无水肿现象。在显微镜下观察肺组织病理切片时发现模型组肺组织结构不完整,支气管壁明显增厚,肺泡周围炎症细胞浸润明显,黏膜出现水肿,形成粘液栓。给予穿心莲有效成分及穿心莲内酯类化合物组观察发现肺组织结构能够保持完整,气道壁增厚现象得到改善,肺泡周围炎症细胞浸润明显减弱,黏膜水肿减轻,无粘液栓形成。显微镜计数大鼠肺部灌洗液中白细胞(WBC)总数、计算嗜酸性粒细胞(EOS)、中性粒细胞(N)、巨噬细胞(M)、淋巴细胞(L)百分含量(%),数据显示：模型组大鼠WBC总数(87.63±2.67)和EOS%(11.76±1.03)明显高于正常组WBC总数(8.88±1.25)和EOS%(1.30±0.28)；穿心莲内酯(A)WBC总数(60.75±2.60)、EOS%(6.25±0.24)；穿心莲内酯衍生物DA WBC总数(58.25±3.11)、EOS%(6.02±0.17)低于模型组,但高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)；穿心莲有效部位(SEA)低剂量组WBC总数(78.5±3.89)、EOS%(9.48±0.35)、中剂量组WBC总数(71.87±3.36)、EOS%(8.39±0.27)、高剂量组WBC总数(67.5+±3.29)、EOS%(7.66±0.43)与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)；其中穿心莲内酯衍生物-1(A-1)WBC总数(54.26±2.76)、EOS%(5.56±0.19)与模型组相比具有显著差异性(P<0.01)；地塞米松(Dex)组WBC总数(31.88±1.96)、EOS%(3.36±0.37)与模型组比较差异显著(P<0.01)。用大鼠ELISA试剂盒对灌洗液(BALF)中炎症因子白介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和免疫因子白介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)进行了检测,结果显示模型组炎症因子IL-1(52.82±2.13)和TNF-α(75.14±5.72)明显高于正常组IL-1(12.94+2.0)和TNF-α(20.12+10.34),A组IL-1(30.79±2.82)和TNF-α[(42.33±13.52);衍生物DA组IL-1(29.86+4.05)和TNF-α(37.34±9.42)低于模型组,高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)；A-1组与模型组相比能显著降低IL-1(27.63±3.03)和TNF-α(36.79±10.85)水平,差异显著有统计学意义(P<0.01)；Dex组IL-1(22.82±4.68)和TNF-α(32.32±9.76)显著低于模型组,差异有统计学意义(P<0.01)；模型组大鼠肺部灌洗液中的免疫因子IL-2(234.41±26.54)和IFN-γ(27.23±5.02)含量明显低于正常组中IL-2(496.01±83.53)和IFN-γ(74.1±10.02),A组IL-2(295.69±85.64)和IFN-γ(48.03±18.16)；DA组IL-2(315.20±57.49)和IFN-γ(56.15±14.05)高于模型组,低于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)；A-1组IL-2(324.55±87.89)和IFN-γ(57.64±28.61)与模型组相比较差异显著(P<0.01)；穿心莲SEA低剂量组IL-2(269.52±30.49)和IFN-γ(43.86±11.65)；中剂量组IL-2(302.83+42.44)和IFN-γ(45.88±32.84)；高剂量组IL-2(371.71±66.82)和IFN-γ(57.55±30.00)与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),Dex组IL-2(389.61±14.67)显著高于模型组,差异有统计学意义(P<0.01)。本课题研究了穿心莲有效成分及穿心莲内酯类化合物的抗哮喘作用,实验数据表明穿心莲内酯抗哮喘效果良好,其衍生物-1抗哮喘效果优于穿心莲内酯,能显著降低炎症细胞数量及炎症因子水平,抗哮喘效果显著。采用中药超分子富集技术得到的穿心莲有效部位对哮喘也有一定的缓解作用,随着剂量的增加,抗哮喘作用梯度增强。