【摘 要】
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本论文对长白山地区药用植物喜冬草（Chimaphila japonica Miq.）醇提物的石油醚和正丁醇萃取层进行化学成分及其肿瘤细胞毒活性研究。喜冬草为杜鹃花科（Ericaceae）喜冬草属（Chimaphila）多年生草本植物,主要分布在中国吉林、辽宁等地,朝鲜、苏联、日本也有分布。据文献报道喜冬草的乙醇或水提取物具有多种药理活性,包括抗炎、镇痛和抗肿瘤等;临床上亦作为利尿及尿道消炎剂,治疗
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本论文对长白山地区药用植物喜冬草（Chimaphila japonica Miq.）醇提物的石油醚和正丁醇萃取层进行化学成分及其肿瘤细胞毒活性研究。喜冬草为杜鹃花科（Ericaceae）喜冬草属（Chimaphila）多年生草本植物,主要分布在中国吉林、辽宁等地,朝鲜、苏联、日本也有分布。据文献报道喜冬草的乙醇或水提取物具有多种药理活性,包括抗炎、镇痛和抗肿瘤等;临床上亦作为利尿及尿道消炎剂,治疗各种水肿和积水,但现阶段国内外对该药用植物的活性成分研究较少。但通过药用植物亲缘学指出的植物亲缘关系—化学成分—药性药效之间存在一定的相关性,喜冬草属（Chimaphila）和鹿蹄草属（Pyrola）具有较近的亲缘关系,所含成分极其接近,主要含有为萜类、甾醇类、黄酮类以及醌类等多种类型化合物,同时具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化等多种药理活性。所以,对喜冬草进行深入的活性物质基础研究,对长白山地区优势资源的开发利用具有十分重要的意义。本研究运用正、反相硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析以及重结晶等方法进行了化学成分的分离与纯化,并通过所得单体化合物的理化性质、波谱分析(~1H-NMR与13C-NMR)以及相关文献的佐证确定了其化合物的化学结构。从喜冬草的石油醚和正丁醇层共分离得到25个单体化合物,包括9个三萜类化合物:α-amyrin（1）、uvaol（2）、triptohypol E（3）、ursolic acid（4）、2α,3α,23-trihydroxyurs-12-en-28-oic acid（5）、3-epi-corosolic acid（6）、corosolic acid（7）、asiatic acid（8）、taraxerol（9）;6个黄酮类化合物:quercetin（10）、quercetin-3-O-α-L-（5’’-O-acetyl）-arabinofuranoside（11）、quercitrin（12）、kaempferol（13）、juglanin（14）、kaempferol-3-O-α-L-5’’-acetyl-arabinofurano side（15）;2个甾醇类化合物:β-sitosterol（16）和daucosterol（17）;2个醌类化合物:chimaphilin（18）和3,4-dihydro-4-hydroxy-2,7-dimethyl-naphthalen-1（2H）one（19）;1个醛类化合物:5-hydroxymethylfurfural（20）;1个苯酚类化合物isohomoarbutin（21）;3个megastigmane glycosides类化合物:（6S,9S）-roseoside（22）、（6R,9S）-9-hydroxymegastigma-4,7-dien-3-one-9-O-β-D-glucopyranoside（23）、3β-hydr oxy-7,8-dihydro-4-oxo-ionol-9-O-β-D-glucopy ranoside（24）和1个木质素类化合物koreanaside A（25）。其中,化合物11、15和23-25是首次从杜鹃花科中分离得到,化合物1-3、5-8、12、14、17、19、20和22是首次从喜冬草属中分离得到,化合物4、9、10、13和16是首次从喜冬草中分离得到。该实验结果表明,三萜类和黄酮类化合物为喜冬草石油醚和正丁醇萃取层的主要化学成分。利用MTT法测定了从喜冬草中分离得到的25个单体化合物对三种肿瘤细胞株（A549,He La和SK-Hep1）的抑制作用,结果显示,30μM浓度时,化合物2、7、16和18对三种肿瘤细胞株均显示出一定的抑制作用。与阳性对照药阿霉素（Doxorubicin）相比,化合物7和18在人肺癌细胞（A549）下具有与其较为相似的肿瘤细胞毒活性,其IC50值分别为5.21±1.42和1.25±1.14μM;化合物7、16和18在人宫颈癌细胞（He La）下具有与其较为相似的肿瘤细胞毒活性,其IC50值分别为6.19±1.51、1.96±0.22和1.21±0.47μM;化合物16和18在人肝癌细胞（SK-Hep1）下具有与其较为相似的肿瘤细胞毒活性,其IC50值分别为1.52±0.32和2.56±0.63μM。本实验对喜冬草的化学成分有了更深入的了解,并一定程度上阐明了其肿瘤细胞毒活性的物质基础,为该资源的合理利用提供了科学依据。
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