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本文回顾了松茸的研究现状,综述了松茸的资源、分类鉴定、生态、生理、分子生物学及生物技术研究与应用等方面的进展,提出了我国特别是四川对松茸研究与应用方面的主要问题。 由于四川地形和气候条件的多样性,四川省拥有丰富的松茸资源,其西部山区是世界松茸资源的中心分布区,松茸资源保护已刻不容缓。在四川省雅江县采集并分离得到了10个菌株,运用电镜技术、AFLP、18S rDNA RFLP、ITS RFLP和ITS序列分析多种方法,对供试菌株的显微形态结构和遗传特性进行了系统研究,获得如下主要研究结果: 1.使用SEM技术观察了10株松茸菌落的自然表面,大都相似,由大量致密的、直径约为1.2~3.2 μm绒毛状菌丝构成。对F11菌株的TEM结果表明:(1)松茸菌丝细胞直径为0.7~1.3 μm,中空,仅见细胞壁和一些膜状结构;(2)少数菌丝细胞内有单个的细胞核,位于非菌丝顶端区域,有明显的核仁;少数细胞正在进行有丝分裂;(3)菌丝具有明显的隔膜;(4)有的菌丝细胞有大量线粒体存在。 2.采用三种AFLP引物对组合,研究松茸菌根菌基因组的遗传特性,结果表明:10株供试菌间具有高度的遗传相似性,在90%相似性处,全部供试菌株聚在一起;在92%相似性水平,10株菌可被分为3个群。同时也探讨了不同引物对组合的用量对AFLP扩增结果的影响,获得了AFLP扩增时所用引物对组合Eco+1/Mse+1、Eco+2/Mse+2及Eco+3/Mse+3的最佳用量分别为1pmoL/5pmoL,0.6pmoL/10pmoL和0.1pmoL/8pmoL。 3.分别以NS1和NS6,NS1和NS8,ITS4和ITS5为引物,对10株松茸菌进行了18S rDNA PCR-RFLP和ITS RFLP分析,结果显示,这些松茸菌株的18S rDNA、ITS片段酶切图谱完全相同;ITS序列结果表明,分离自四川省雅江县的松茸菌与Tricholoma matsutake的菌株在系统发育上高度同源,在分类上应属于Tricholoma matsutake。