哺乳动物卵泡发育是一个极为复杂的过程。这一过程主要受垂体促性腺激素的调控，此外，卵巢局部产生的其他激素及生长因子等也参与卵泡发育的调节。卵泡主要由一个位于中心的卵母细胞及外围众多的颗粒细胞组成。在促性腺激素等的调控下，卵泡中颗粒细胞增殖、分化，并可通过旁分泌和缝隙连接的通讯方式控制卵母细胞的生长和成熟，因而卵泡发育是处在一个庞大的调控系统严格控制之下的特殊的细胞周期运行的过程。随卵泡发育，卵母细胞也开始生长，卵母细胞的发育成熟过程中有两个特殊时期，即要经历减数分裂过程中的两次停滞，这也是一个特殊的细胞周期调控过程。然而到目前为止，有关调控卵泡及卵母细胞生长发育的分子生物学机制尚未得到阐明。细胞周期素(cyclins)是调节细胞周期进程的一类重要蛋白质，显然这类蛋白对卵泡发育也起着重要作用。cyclin G1作为周期素家族中的一名新成员，其在卵巢的表达及其与卵泡生长发育和卵母细胞成熟的关系尚未见研究报道。 为此，本实验拟进行以下研究：第一，性成熟前小鼠用孕马血清促性腺激素(PMSG)刺激卵泡生长，用绒毛膜促性腺激素(hCG)刺激卵泡排卵及向黄体转化。于给药后不同时间取出卵巢，分别用免疫组织化学染色方法和组织原位杂交技术检测不同发育阶段卵泡中cyclin Gl蛋白及mRNA的表达情况，从而研究cyclin G1表达与卵泡发育的关系。第二，取不同成熟阶段的卵，用细胞免疫荧光方法检测其中cyclin Gl蛋白表达情况，半定量RT-PCR技术检测其中cyclin Gl mRNA的表达水平的变化，从而研究cyclin Gl与卵母细胞成熟的关系。实验结果如下： 一、免疫组织化学染色结果显示:cyclin Gl蛋白的表达定位在颗粒细胞的胞核。其在颗粒细胞的表达水平随卵泡发育而逐渐增强，窦状卵泡中达到最高，排卵前卵泡中降低，当颗粒细胞分化为黄体细胞后表达水平进一步降低。cyclin Gl蛋白在各个时期卵泡的卵母细胞中均有表达，该表达的定位与卵泡生长发育的不同阶段有关，随着卵泡的发育，cyclin Gl在卵母细胞的表达由胞核转至胞浆。闭锁卵泡中cyclin Gl蛋白的表达水平很低。 二、组织原位杂交结果显示：Cyclin Gl mRNA表达在细胞浆。随卵泡发育，颗粒细胞中cyclin Gl在mRNA水平的表达变化和蛋白水平的变化一致。cyclin Gl mRNA在各个时期卵泡的卵母细胞中均有表达。 三、细胞免疫荧光染色结果显示：cyclin Gl蛋白在处于生发泡(germinal vesical，GV)时期的卵母细胞中表达水平较低，当卵母细胞生发泡破裂(germinal vesical breakdown，GVBD)后，即GVBD卵中，表达增强。与处于减数分裂MⅡ阻滞期的卵母细胞相比，受精卵的cyclinG1 蛋白表达水平也明显增强。 四、卵母细胞RT-PCR结果显示：GV卵中仅有较弱的cyclin GlmRNA表达，GVBD卵中，该表达增强；与处于减数分裂MII阻滞期的卵母细胞相比，受精卵的cyclin G1mRNA表达明显增强。不同成熟阶段卵细胞中cyclin G1mRNA表达水平的变化和蛋白水平的变化一致。 本研究的结论是：cyclin G1在小鼠卵泡发育及卵母细胞成熟过程中的表达具有时空特异性，即cyclin G1在颗粒细胞及卵母细胞中的表达水平及定位因卵泡发育的不同时期而异；提示cyclin G1可能作为细胞周期的正调节因子参与了卵泡生长发育和卵母细胞成熟过程的调控。