microRNA-1抑制肾透明细胞癌生物学行为的分子作用机制研究

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目的:研究mi R-1在肾癌细胞系及肾癌组织中的表达情况;研究mi R-1对肾癌细胞系增殖、迁移及侵袭能力的影响;研究mi R-1对肾癌细胞周期的影响;鉴定mi R-1在肾癌中的直接靶基因。方法:使用RT-PCR技术检测mi R-1在肾癌组织和肾癌细胞系中的表达,通过MTS法、Edu法以及集落形成实验检测mi R-1对肾癌细胞增殖的影响,通过流式测细胞周期技术检测mi R-1对细胞周期的影响,通过transwell法检测mi R-1对细胞迁移和侵袭能力的影响,使用Western blot技术和双荧光素酶报道系统验证mi R-1的靶基因。结果:与正常对照组织、对照细胞系相比,mi R-1在肾癌组织和肾癌细胞系中显著低表达,结果有统计学意义;增殖及迁移、侵袭实验表明过表达mi R-1可以明显抑制肾癌细胞增殖、迁移和侵袭能力,而抑制mi R-1可以促进肾癌细胞增殖、迁移和侵袭能力。Western Blot及双荧光素酶报道系统验证结果显示CDK4,CDK6,Caprin1和Slug为mi R-1的直接靶基因。结论:mi R-1是一个肿瘤抑制基因,并在肾癌发生、发展过程中发挥了显著的抑癌作用。mi R-1有希望成为新的肾癌治疗靶点。
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