子宫内膜异位症中nm23-H1基因和p53基因的表达及相关性研究

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目的:通过对内异症患者的异位内膜组织和正常育龄妇女子宫内膜组织中nm23-H1基因和p53基因的mRNA和蛋白表达水平的研究,并分析两基因表达的相关性,以便进一步明确两基因在内异症发生中的作用及作用机制。方法:收集41例内异症患者的异位内膜组织和47例正常对照组子宫内膜组织标本,提取组织总RNA,反转录成c DNA,用qRT-PCR方法检测nm23-H1基因和p53基因在两组之间的表达水平;使用激光捕获显微切割技术捕获19例内异症组和16例对照组子宫内膜腺上皮细胞,微量提取组织RNA,反转录成c DNA,用qRT-PCR方法检测nm23-H1基因和p53基因在两组子宫内膜腺上皮细胞中的表达水平。39例内异症组异位内膜组织和35例对照组子宫内膜组织标本提取总蛋白,Western Blot方法检测nm23-H1基因和p53基因的蛋白表达水平。结果:1.常规qRT-PCR结果:41例内异症组和47例对照组的nm23-H1基因的mRNA表达水平分别为0.42±0.19,0.96±0.98;内异症组和对照组p53基因的mRNA表达水平分别为0.44±0.5,0.86±1.05;与对照组相比,异位内膜组织中nm23-H1基因和p53基因的mRNA表达水平下调,差异有统计学意义(t=3.738,P=0.000;t=2.405,P=0.019)。2.基于激光捕获的qRT-PCR结果:经LCM捕获19例内异症组和16例对照组中子宫内膜腺上皮细胞,其nm23-H1基因的mRNA表达水平分别为0.46±0.38,1.37±0.95;内异症组和对照组p53基因的mRNA表达水平分别为0.55±0.43,1.39±1.36;异位症组中nm23-H1基因和p53基因mRNA表达水平均低于对照组,两组之间差异有统计学意义(t=3.597,P=0.002;t=2.349,P=0.031)。3.蛋白表达结果:39例内异症组和35例对照组中nm23-H1蛋白表达水平分别为0.71±0.41,1.06±0.73;内异症组和对照组P53蛋白表达水平分别为0.65±0.38,0.96±0.39;与对照组相比,内异症组nm23-H1基因和p53基因蛋白表达水平均下降,差异有统计学意义(t=2.557,P=0.013;t=3.483,P=0.001)。4.nm23-H1基因和p53基因表达的关联性:常规qRT-PCR和基于LCM的qRT-PCR两者方法检测内异症组中nm23-H1基因和p53基因在mRNA水平上的表达,均有一定的相关性(r=0.356,p=0.022;r=0.604,p=0.013),对照组中两基因mRNA表达无相关性(r=0.165,p=0.268;r=0.188,p=0.486);Western Blot检测nm23-H1和P53蛋白水平,在内异症组中表达有一定的相关性(r=0.571,p=0.000),对照组中蛋白表达无相关性(r=0.257,p=0.142)。结论:内异症中nm23-H1基因和p53基因的mRNA和蛋白表达水平下降,可能与内异症的发生相关,nm23-H1基因可能通过p53途径导致内异症的发生,其确切机制仍有待作进一步研究。
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