草乌生物碱提取分离、指纹图谱分析及生物活性研究

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目的:草乌为毛茛科乌头属植物北乌头的干燥块根,其药效较高的主要成分为乌头类生物碱,具有祛风除湿、温经止痛等功效,但具有较大毒性。有研究表明,该毒性较大的生物碱为双酯型生物碱,易发生水解,其水解产物中的单酯型乌头碱仍然具有较好的止痛抗炎作用,毒性却大大降低。本课题旨在建立一种快速、简便、高效的生物碱提取方法,通过定性分析和指纹图谱分析的方法,对其水解产物的化学成分进行研究,为草乌类药材的质量评价方法和低毒成分药效研究打下基础。方法:将草乌中经提取、水解得到的双酯型生物碱和单酯型生物碱利用高效液相色谱与波谱联合技术手段进行鉴定,加深其化学成分的研究,并将其中三种单酯型生物碱应用于大鼠佐剂性关节炎的治疗。建立草乌药材标准指纹图谱,利用相似度和多元统计分析法对不同批次草乌药材进行分析。结果:应用各种色谱分离方法从草乌的萃取物中得到了4个化合物,分别为乌头碱,新乌头碱,次乌头碱,脱氧乌头碱。乌头碱水解产物中分离鉴定了3种化合物,分别为焦乌头碱、苯甲酰乌头碱、乌头原碱;新乌头碱水解产物中分离鉴定了3种化合物,分别为焦新乌头碱、苯甲酰新乌头碱、新乌头原碱;从次乌头碱水解产物中分离鉴定了3种化合物,分别为焦次乌头碱、苯甲酰次乌头碱、次乌头原碱;从脱氧乌头碱水解产物中分离鉴定了2种化合物,分别为焦脱氧乌头碱、苯甲酰脱氧乌头碱。其中焦乌头碱、乌头原碱、焦新乌头碱、焦次乌头碱、焦脱氧乌头碱为首次从双酯型乌头碱降解产物中分离得到。在此基础上进一步指纹图谱研究,并对收集到的21批草乌药材进行分析,对其主要化合物的含量差异进行评价。考察了苯甲酰乌头碱、苯甲酰次乌头碱和苯甲酰新乌头碱等三种单酯型生物碱的生物活性。结果显示,这三种单酯型生物碱对大鼠原发性和继发性足肿胀率起到明显抑制作用,能够降低佐剂性关节炎大鼠红细胞沉降率和白细胞数量。结论:本课题对草乌化学成分进行了更加深入的研究,在此基础上为草乌药材的指纹图谱提供了快速、科学的评价方法。最后进行了单酯型生物碱生物活性研究,结果初步证明单酯型生物碱对类风湿关节炎的治疗具有一定作用。故而,本课题的研究无论是在理论水平还是在社会实际应用价值上,均具有一定的意义。
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