目的：通过对我院24株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和62株非产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药性分析,并对24株产ESBLs大肠埃希菌进行同源性分析,了解我院产ESBLs大肠埃希菌的检出率和耐药性,为临床合理使用抗生素和控制院内感染提供依据。方法：收集我院临床科室分离的86株大肠埃希菌,应用VITEK2微生物自动分析仪进行鉴定及药敏试验,同时采用NCCLS推荐的纸片扩散表型确证法检测ESBLs酶。提取细菌基因组DNA,采用rep-PCR法对24株产ESBLs大肠埃希菌进行同源性鉴定。结果：药敏结果显示产ESBLs菌株对临床常用的12种抗菌药物耐药率远高于非产ESBLs菌株,产ESBLs菌株对头孢菌素类抗生素耐药率超过了80%,对氨基糖苷类、磺胺类、喹诺酮类抗生素耐药率均很高,呈现多重耐药及高耐药率的特点,24株产ESBLs大肠埃希菌用rep-PCR分型共分为20种基因型。结论：产ESBLs大肠埃希菌具有多重耐药及高耐药率的特点,无克隆株的流行,但存在一定的交叉感染,实验室应加强对产ESBLs菌株的检测,指导临床合理使用抗生素,实施有效的措施控制ESBLs菌株的扩散,防止院内感染的暴发流行。