APP17肽对心肺复苏大鼠海马神经元存活信号转导通路的影响缺血缺氧及再灌注损伤是心肺复苏后不同程度脑功能障碍的主要原因，神经元存活信号转导通路异常导致神经元凋亡是其中非常重要的机制之一。在神经元存活信号转导通路上，多种神经营养因子、受体、相关蛋白、蛋白激酶、核转录因子等均参与了信号转导作用，使神经存活信号从细胞膜表面到细胞浆再传到细胞核内，通过调控神经营养因子、促凋亡蛋白、抑凋亡蛋白的合成而影响神经元存活。心肺复苏后缺血缺氧及再灌注损伤时神经元存活信号转导通路究竟哪个环节出现异常，未见报道。APP17肽(β-Amyloidprecursorprotein,APP,319～335肽段)，是β-淀粉样肽前体蛋白中的一个肽段。在糖尿病脑病、阿尔茨海默病及D-半乳糖脑老化等动物模型中，已证实APP17肽具有促进神经营养因子表达增加，激活神经元存活信号转导通路，改善海马神经元退行性变和学习、记忆功能的作用。APP17肽作为一种外源性神经营养因子能否激活缺血缺氧及再灌注损伤后神经元信号转导通路，以保护损伤神经元，未见报道。 本研究应用窒息法致大鼠心跳骤停模型，观察心肺复苏后2小时大鼠海马神经元CA1区超微结构；神经营养因子(nervegrowthfactor,NGF)、脑源性神经营养因子(brainderivedneurotrophicfactor,BDNF)；神经元存活信号转导通路中胰岛素受体(insulinreceptor,IR)、胰岛素受体底物-1(insulinreceptorsubstrate-1，IRS-1)、磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphoinositide3-kinase，PI3K)、蛋白激酶B(proteinkinaseB，PKB)、磷酸化cAMP应答元件结合蛋白(phosphorylationofcAMPresponseelementbindingprotein,p-CREB)变化，以及心肺复苏后早期应用APP17肽对上述指标的影响，以探讨APP17肽作用机制，为寻找有效脑保护剂提供依据。 本实验选用SD成年雄性大鼠27只，随机分为对照组(9只)、复苏组(9只)、APP17肽组(9只)。建立大鼠心肺复苏模型。将3组大鼠麻醉、固定，监测心电图；分离气管，切开行气管插管术，接动物呼吸机；分离右侧颈总动脉，插导管入心室，监测心室内压；分离左侧颈总静脉、留置输液管。对照组仅完成上述步骤，其余两组在手术操作完成后，稳定10分钟，然后在呼气末夹闭气管，窒息大约7～9分钟，致心脏停搏，立即开放呼吸机，给100％纯氧，予肾上腺素0.02mg/kg，实施胸外按压。APP17肽组大鼠于自主呼吸循环恢复(returnofspontaneouscirculation，ROSC)后立即给予10ug/300g，复苏组大鼠给予等量生理盐水，ROSC后2小时，断头取脑。对照组大鼠观察2小时后，断头取脑。观察电镜下海马神经元CA1区超微结构变化，免疫组织化学染色和Western-blot蛋白定量测定大鼠海马CA1区NGF、BDNF以及IR、IRS-1、PI3K、PKB、p-CREB的变化，分别应用Imageproplus5.0图像分析软件和Bandscan5.0凝胶电泳分析软件对免疫组织化学染色图像以及Western-blot结果进行分析。 实验结果：①电镜下超微结构显示复苏组海马神经元变形，线粒体浓缩(嵴消失)，粗面内质网上多聚核糖体脱颗粒，高尔基体囊泡扩张，溶酶体大量增加，微管结构出现溶解，细胞核膜凹陷，染色质聚集；血管管腔狭窄，周围大量少突胶质细胞压迫管壁，血管内皮细胞肿胀，血脑屏障破坏，出现水肿。而APP17肽组海马神经元超微结构明显改善；②免疫组化结果：复苏组神经元存活信号转导通路上NGF、BDNF以及IR、IRS-1、PKB、p-CREB较对照组表达减少，PI3K表达较对照组无明显差异；应用APP17肽后，上述指标较复苏组明显增加。③Westem-blot蛋白定量结果：复苏组NGF、IRS-1、PKB、p-CREB蛋白含量减少；应用APP17肽后这些蛋白含量增加。 结论：1.心肺复苏后2小时大鼠海马CA1区神经元出现超微结构异常；神经营养因子分泌减少、神经元存活信号转导通路出现障碍。2.APP17肽作为一种外源性神经营养因子，具有保护神经元超微结构、增加内源性神经营养因子、激活神经元存活信号转导通路的作用。