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精子发生过程是一个高度复杂和精密的过程,起源于精原干细胞(spermatogonial stem cell,SSCs)自我更新和分化,并受到广泛的调节。MicroRNA在调节精子发生的准确性和复杂性上起着至关重要的作用。 通过荧光定量RT-PCR检测了34个miRNAs在睾丸不同发育时期的表达量,结果显示,不同的microRNAs在睾丸发育中具有不同的表达模式。大部分 microRNAs睾丸发育过程中的表达具有高度的阶段特异性,他们分别在精子发生的不同时期起着调控作用。MiR-125a,miR-322,miR-199b,miR-295等在睾丸发育过程中表达量显著下降,而miR-34c,miR-29b在睾丸过程中表达量显著上升。基于此结果,我们挑选miR-125a进行进一步的研究。构建miR-125a慢病毒过表达和抑制载体并包装成慢病毒颗粒,然后使该病毒颗粒感染体外培养的SSCs,结果发现miR-125a的过表达能增加体外培养的SSCs数目,而miR-125a的抑制则降低体外培养的SSCs数目。EdU标记法和Hoachst33342、PI(碘化丙啶)双染实验结果显示miR-125a能通过促进体外培养SSCs的增殖、抑制凋亡调控体外培养SSCs的数目。通过软件预测、结合文献报道资料以及实时荧光定量RT-PCR和Western blot证明Bak1是miR-125a的一个靶基因。miR-125a很可能通过调控Bak1的表达抑制体外培养SSCs的凋亡。MicroRNA在精子发生过程中功能的阐明能加深我们对SSCs自我更新和分化机制的理解,对男性不育症的诊断和治疗具有重要意义。