本研究以爱莫无核叶片、叶柄和无核白花药、子房等外植体为试材,通过器官发生途径和胚状体发生途径建立了葡萄再生体系;并将携带有中国野生葡萄芪合酶基因的植物表达载体pWR306,通过农杆菌介导法对爱莫无核叶片叶柄、长穗无核白叶柄、无核白胚状体及胚性愈伤进行遗传转化,研究了潮霉素(Hyg)筛选浓度、头孢霉素(Cef)脱菌浓度、农杆菌侵染浓度、预培养时间等遗传转化因素;并通过Hyg筛选、PCR检测、Southern杂交等方法对外源基因的整合进行了检测。取得的主要结果如下:1.葡萄再生体系的建立(1)器官发生途径再生体系的建立以爱莫无核葡萄的叶片、叶柄为材料,通过研究不同激素浓度组合对外植体愈伤诱导及不定芽分化的影响,建立了葡萄器官发生途径的再生体系。叶片再生适宜培养基为MS+TDZ 2.5mg·L-1+NAA 0.1mg·L-1,再生率为21.57%;叶柄再生适宜培养基为MS+TDZ 1.0mg·L-1,再生率为2.08%;不定芽伸长培养基为MS+TDZ 0.25mg·L-1+NAA 0.01mg·L-1;生根成苗培养基为1/2MS+IBA 0.1mg·L-1。(2)胚状体发生途径的建立以无核白葡萄花药、子房为材料,研究葡萄胚状体发生途径的再生。结果表明:无核白的花药和子房胚性愈伤组织诱导最佳培养基分别为MS+BA 4.0mg·L-1+2,4-D 0.5mg·L-1+3%蔗糖和MS+BA 4.0 mg·L-1+2,4-D 1.0mg·L-1+蔗糖30g·L-1;胚状体诱导培养基为MS+BA 4.0mg·L-1+蔗糖30g·L-1;在无激素的MS培养基中胚状体很快萌发;成苗培养基为WPM+蔗糖15g·L-1。2.遗传转化体系的优化(1)Hyg选择压的确定以爱莫无核叶片和扩繁单芽茎段为试材,研究Hyg对葡萄叶片不定芽再生及植株生长的影响,确定了Hyg筛选浓度和筛选方式。葡萄遗传转化后进行延迟筛选,并逐步增加潮霉素的浓度,起始浓度为3mg·L-1再逐步增加至12mg·L-1可减少对再生的抑制。(2)脱菌素Cef浓度的确定以爱莫无核叶片为试材,研究Cef对不定芽再生的影响,确定了Cef的最佳脱菌浓度为400mg·L-1。(3)农杆菌侵染浓度的确定分别以叶片、叶柄、胚状体和胚性愈伤为试材,研究在不同浓度农杆菌下脱菌的难