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目的制备广州管圆线虫幼虫粗抗原、排泄分泌粗抗原、成虫粗抗原、幼虫纯化抗原和成虫纯化抗原功能化纳米金棒,筛选广州管圆线虫功能化纳米金棒诊断抗原及最适宜浓度,证实功能化纳米金棒能够检测早期或低度感染的广州管圆线虫血清抗体。方法1.金晶种子生长法聚合径长比可控的纳米金棒。2.液氮研磨法制备广州管圆线虫幼虫粗抗原和成虫粗抗原、RPMI-1640培养法制备排泄分泌粗抗原、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)制备幼虫纯化抗原和成虫纯化抗原。巯基化粗抗原、纯化抗原与纳米金棒结合,制备功能化纳米金棒。采用紫外分光光度计扫描,通过比较表面等离子共振吸收峰的红峰移位大小,优选出功能化纳米金棒最适包被浓度。3.广州管圆线虫功能化纳米金棒检测不同感染时间、不同感染度及不同稀释度的大鼠血清抗体,根据表面等离子共振吸收峰红峰移位的变化筛选出广州管圆线虫的优势诊断抗原。4.广州管圆线虫功能化纳米金棒检测不同感染时间、不同感染度、不同稀释度血清抗体与ELISA检测的结果进行比较,探索功能化纳米金棒检测的敏感性和灵敏度。结果1.成功制备广州管圆线虫幼虫粗抗原、成虫粗抗原、排泄分泌粗抗原、幼虫纯化抗原和成虫纯化抗原功能化纳米金棒,并优选其最适包被浓度和对应的最大红峰移位:幼虫粗抗原包被浓度为30μg/mL,对应纵向等离子共振(LSPR)吸收峰最大红峰移位为35nm;成虫粗抗原最适包被浓度为40μg/mL,对应最大的红峰移位为35nm;排泄分泌粗抗原包被浓度为30μg/mL,包被前后表面等离子共振吸收峰出现了最大红峰移位为35nm;幼虫纯化抗原最优蛋白分子量为43kD,相应的抗原浓度为20μg/mL时,包被前后表面等离子共振吸收峰出现了最大程度的红移为25nm;成虫纯化抗原最优蛋白分子量为45kD,对应的抗原浓度为10μg/mL时,相应的LSPR吸收峰最大程度的红峰移位为40nm。2.广州管圆线虫幼虫粗抗原、成虫粗抗原、排泄分泌粗抗原、幼虫纯化抗原和成虫纯化抗原功能化纳米金棒检测不同感染时间、不同感染度的血清抗体,均可识别不同感染度第5d血清抗体为阳性,最低感染量为50条Ⅲ期幼虫。在轻度感染时比大鼠血清抗体ELISA试剂盒提前9d检测到阳性血清抗体,在中、重度感染时比大鼠血清抗体ELISA试剂盒提前2d检测到阳性血清抗体。其中成虫纯化抗原功能化的纳米金棒识别广州管圆线虫早期感染血清抗体的敏感性更高,比传统ELISA检测法灵敏度高,检测大鼠阳性血清抗体最大稀释度可达1:600。结论获得晶种生长法径长比可控、产量高的纳米金棒;优选出广州管圆线虫优势诊断抗原为成虫纯化抗原;广州管圆线虫粗抗原功能化纳米金棒抗原制备简单,成本低,检测血清抗体敏感性好,特异性强,比传统的ELISA法更具有检测抗体时间早、稀释度高、感染度低的优势,为广州管圆线虫病感染早期及低度感染检测提供全新的思路和技术支持。有望应用于动态流行病学调查和临床试剂盒的研发。