由于昆虫营养丰富,含有丰富的氨基酸,脂肪酸以及蛋白质等多种营养元素,因此人们选择可食用昆虫用于食品以及药品产业。属天蛾科(Sphingidae)鳞翅目的豆丹(Clanis bilineata Walker),由于其富含大量蛋白质和油脂,因此它也曾人们被称为经济昆虫。豆丹在江苏、安徽、山东等省正在大规模的人工养殖,打开了豆丹在食品以及药物行业上的发展之路。1.检测豆丹的氨基酸组成,豆丹含有7种人体必需氨基酸,即甲硫氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸、苏氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、亮氨酸。检测豆丹的蛋白质以及脂肪组成,测定豆丹的蛋白质质量分数为68.31%,以及经索式抽提得到的粗脂肪分数为24.43%,发现豆丹是一种高蛋白昆虫。采用超声辅助水代法(UAAE)提取豆丹油,并且与传统的工业方法索式抽提(SE)相比较。首次研究通过超声辅助水代提取的豆丹油(UAAEO)的理化性质和抗氧化特性。和索氏抽提得到的豆丹油(SEO)比较,UAAEO表现出更低的酸价(AV),过氧化值(PV),茴香胺值(PAV)以及更高含量的多不饱和脂肪酸和优良的热稳定性。通过GC-MS进行鉴定UAAEO和SEO,总共发现19种脂肪酸,包括八种饱和脂肪酸(SAFA),三种单不饱和脂肪酸(MUFA),五种多不饱和脂肪酸(PUFA)以及三种奇数碳脂肪酸(OCFA)。根据DPPH自由基清除以及β-胡萝卜素漂白实验,UAAEO比SEO表现出较强的抗氧化能力。与SEO(IC50=80.47μg/mL)相比较,UAAEO具有更好的清除DPPH自由基的效果(P<0.05,IC50=76.23μg/ml)。β-胡萝卜素漂白试验是一种简便、准确的测定样品油抗氧化活性的方法。UAAEO(IC50=1.56mg/mL)的脂质过氧化的抑制活性明显(P<0.05)高于SEO(IC50=2.67 mg/mL)。此外,通过脂质类定性的测定,超声辅助水代法得到的下层乳浊液含有更多的磷脂,为后续实验数据做出最有利的证实。2.选取超声温度,超声功率,提取时间以及超声间隔时间四个变量,利用响应面方法优化超声辅助水代提取豆丹油,得到最高的豆丹油提取率是19.47%。最优条件是超声功率、超声温度、超声时间、超声间隔时间分别为400W、40℃、50min、2s。并且利用得到的最佳条件对模型的预测能力进行了重现性实验研究。豆丹油的实验值(18.91±0.20g/100g)非常接近预测值(18.62g/100g)。结果表明回归模型的预测值与实验值之间存在高度的相关一致性(R2=0.9826,R2adj=0.9652)。因此,该模型可以有效地预测豆丹通过超声辅助水代法提取的豆丹油产量。3.参照第一章中脂质类的定性分析,超声辅助水代法获得的下层乳浊液富含磷脂,并且曾有许多研究报道称浓缩磷脂对于H202损伤的PC12细胞的保护作用,因此,我们选择750 μM H202建立损伤的PC12细胞模型,并用MTT方法测定细胞的存活率,研究发现500-1250 μg/mL的样品保护组能够明显提高细胞的存活率。测定样品中的各种抗氧化酶(SOD、CAT)以及抗氧化物质(GSH)的活性,发现样品保护组的酶活明显高于损伤组,GSH含量也相对更高。倒置相差显微镜能够观察细胞的明显形态,样品组的细胞形态接近于对照组中细胞的形态。荧光显微镜能够观察细胞的存活状况,相比模型组,样品组的损伤细胞比例明显降低。并测定Caspase-3酶的酶活,其在细胞凋亡的过程中起着重要的作用,结果发现样品组的酶活显著低于损伤组。检测细胞的凋亡率,相对于损伤组(31.9%),可以看出样品保护组能够降低细胞的凋亡率(16.9%)。4.鉴定超声辅助水代法得到的下层乳浊液,采用液相色谱法测定下层磷脂的含量,鉴定得出含有卵磷脂200mg/g,脑磷脂100mg/g。此结果显示了下层物质即磷脂能够对H2O2损伤的PC12细胞起到保护作用。采用气相测定下层脂肪酸的含量,含有6种饱和脂肪酸(其中有2种奇数碳脂肪酸),4种单不饱和脂肪酸,5种多不饱和脂肪酸,尤其α-亚麻酸含量丰富,以及采用LC-MSMS和MaLdi-TOF-TOF测定下层物质的蛋白。